Cancer Research Institute, University of South China, Hengyang, Hunan Province, China.
Clin Exp Pharmacol Physiol. 2010 Dec;37(12):1147-53. doi: 10.1111/j.1440-1681.2010.05444.x.
二烯丙基二硫（DADS）具有作为化学预防和治疗剂的潜力。先前的研究报告称，Ras 相关 C3 肉毒梭菌毒素底物 2（Rac2）是 NADPH 氧化酶复合物的调节亚基，在 DADS 诱导的人白血病 HL-60 细胞凋亡中上调。本研究旨在探讨 Rac2、NADPH 氧化酶和活性氧（ROS）在 DADS 诱导的凋亡中的作用。
通过 Sybergreen 实时定量聚合酶链反应测量 HL-60 细胞中 Rac2 基因以及 NADPH 氧化酶亚基的其他五个基因的表达。使用 RNA 干扰测试 Rac2 的效果。通过 Western blot 分析评估蛋白质表达，通过 2'，7'-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）荧光测量 ROS 水平。使用 DNA 片段化和流式细胞术分析检测凋亡细胞。
在 DADS 诱导的凋亡中，Rac2 基因和蛋白水平显着上调，NADPH 氧化酶被激活。用小干扰（si）RNA 预处理 HL-60 细胞以抑制 Rac2 可阻断 DADS 诱导的凋亡。在佛波醇肉豆蔻酸酯刺激的细胞中，DADS 诱导的细胞内 ROS 产生增加，但在 Rac2 siRNA 处理的细胞中减少。与 Rac2 有效，DADS 处理的细胞相比，在 Rac2 siRNA 处理的细胞中，激活蛋白-1 和 caspase 3 水平降低，c-myc 蛋白水平增加，p38 蛋白水平不变。
这些结果表明 NADPH 氧化酶是 DADS 诱导的 ROS 的主要来源。此外，Rac2 在 DADS 诱导的凋亡中选择性激活 c-Jun N-末端激酶途径，而不是 p38 途径。因此，Rac2、NADPH 氧化酶和 ROS 在 DADS 诱导的人白血病 HL-60 细胞凋亡中起关键作用。
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