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用于定量检测HIV-1 DNA和RNA的竞争性聚合酶链反应分析

Competitive polymerase chain reaction assay for quantitation of HIV-1 DNA and RNA.

作者信息

Stieger M, Démollière C, Ahlborn-Laake L, Mous J

机构信息

Diagnostics Division, F. Hoffmann-La Roche Ltd., Basel, Switzerland.

出版信息

J Virol Methods. 1991 Sep-Oct;34(2):149-60. doi: 10.1016/0166-0934(91)90095-h.

Abstract

A quantitative PCR assay for the detection of HIV-1 nucleic acids is described. The assay is based on a competitive internal standard nucleic acid which can be discriminated from target sequences by the presence of a new restriction enzyme site. The method was used to quantitate plasmid molecules containing HIV-1 sequences, HIV-1 DNA and HIV-1 RNA purified from HIV-1-infected tissue culture cells as well as HIV-1 DNA present in the peripheral blood mononuclear cells of an AIDS patient. The assay will be valuable for assessing viral load in AIDS patients and for the study of viral gene expression.

摘要

描述了一种用于检测HIV-1核酸的定量聚合酶链反应(PCR)检测方法。该检测方法基于一种竞争性内标核酸,通过新的限制性酶切位点的存在可将其与靶序列区分开来。该方法用于定量含有HIV-1序列的质粒分子、从感染HIV-1的组织培养细胞中纯化的HIV-1 DNA和HIV-1 RNA,以及一名艾滋病患者外周血单核细胞中存在的HIV-1 DNA。该检测方法对于评估艾滋病患者的病毒载量以及研究病毒基因表达将具有重要价值。

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