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G 蛋白 βγ 亚基基因转录本在小鼠嗅觉感觉上皮中的表达谱。

Expression profile of G-protein βγ subunit gene transcripts in the mouse olfactory sensory epithelia.

机构信息

Department of Biological Sciences, University of Maryland Baltimore County, Baltimore MD, USA.

出版信息

Front Cell Neurosci. 2013 Jun 4;7:84. doi: 10.3389/fncel.2013.00084. eCollection 2013.

Abstract

Heterotrimeric G-proteins mediate a variety of cellular functions, including signal transduction in sensory neurons of the olfactory system. Whereas the Gα subunits in these neurons are well characterized, the gene transcript expression profile of Gβγ subunits is largely missing. Here we report our comprehensive expression analysis to identify Gβ and Gγ subunit gene transcripts in the mouse main olfactory epithelium (MOE) and the vomeronasal organ (VNO). Our reverse transcriptase PCR (RT-PCR) and realtime qPCR analyses of all known Gβ (β1,2,3,4,5) and Gγ (γ1,2,2t,3,4,5,7,8,10,11,12,13) subunits indicate presence of multiple Gβ and Gγ subunit gene transcripts in the MOE and the VNO at various expression levels. These results are supported by our RNA in situ hybridization (RISH) experiments, which reveal the expression patterns of two Gβ subunits and four Gγ subunits in the MOE as well as one Gβ and four Gγ subunits in the VNO. Using double-probe fluorescence RISH and line intensity scan analysis of the RISH signals of two dominant Gβγ subunits, we show that Gγ13 is expressed in mature olfactory sensory neurons (OSNs), while Gβ1 is present in both mature and immature OSNs. Interestingly, we also found Gβ1 to be the dominant Gβ subunit in the VNO and present throughout the sensory epithelium. In contrast, we found diverse expression of Gγ subunit gene transcripts with Gγ2, Gγ3, and Gγ13 in the Gαi2-expressing neuronal population, while Gγ8 is expressed in both layers. Further, we determined the expression of these Gβγ gene transcripts in three post-natal developmental stages (p0, 7, and 14) and found their cell-type specific expression remains largely unchanged, except the transient expression of Gγ2 in a single basal layer of cells in the MOE during P7 and P14. Taken together, our comprehensive expression analyses reveal cell-type specific gene expression of multiple Gβ and Gγ in sensory neurons of the olfactory system.

摘要

异三聚体 G 蛋白介导多种细胞功能,包括嗅觉系统感觉神经元中的信号转导。虽然这些神经元中的 Gα 亚基得到了很好的描述,但 Gβγ 亚基的基因转录表达谱在很大程度上是缺失的。在这里,我们报告了我们的综合表达分析结果,以鉴定小鼠主要嗅觉上皮 (MOE) 和犁鼻器 (VNO) 中的 Gβ 和 Gγ 亚基基因转录本。我们使用逆转录 PCR (RT-PCR) 和实时 qPCR 分析所有已知的 Gβ (β1、2、3、4、5) 和 Gγ (γ1、2、2t、3、4、5、7、8、10、11、12、13) 亚基,结果表明在 MOE 和 VNO 中存在多种 Gβ 和 Gγ 亚基基因转录本,表达水平各异。这些结果得到了我们的 RNA 原位杂交 (RISH) 实验的支持,该实验揭示了两个 Gβ 亚基和四个 Gγ 亚基在 MOE 中的表达模式,以及一个 Gβ 和四个 Gγ 亚基在 VNO 中的表达模式。使用双探针荧光 RISH 和 RISH 信号的线强度扫描分析,我们发现 Gγ13 在成熟的嗅觉感觉神经元 (OSN) 中表达,而 Gβ1 存在于成熟和未成熟的 OSN 中。有趣的是,我们还发现 Gβ1 是 VNO 中的主要 Gβ 亚基,并存在于整个感觉上皮中。相比之下,我们发现 Gγ 亚基基因转录本的表达具有多样性,Gγ2、Gγ3 和 Gγ13 在 Gαi2 表达的神经元群体中表达,而 Gγ8 在两个层中表达。此外,我们在三个出生后发育阶段 (p0、7 和 14) 确定了这些 Gβγ 基因转录本的表达,发现它们的细胞类型特异性表达基本保持不变,除了 Gγ2 在 p7 和 p14 期间在 MOE 的单个基底细胞层中的短暂表达。综上所述,我们的综合表达分析揭示了嗅觉系统感觉神经元中多种 Gβ 和 Gγ 的细胞类型特异性基因表达。

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