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将 CRISPR/Cas9 介导的转基因插入到小鼠 Rosa26 安全港的胚胎显微注射。

Microinjection of Zygotes for CRISPR/Cas9-Mediated Insertion of Transgenes into the Murine Rosa26 Safe Harbor.

机构信息

Genome Editing at Macquarie (GEM), Dementia Research Centre, Macquarie University, Sydney, NSW, Australia.

出版信息

Methods Mol Biol. 2022;2495:115-128. doi: 10.1007/978-1-0716-2301-5_7.

Abstract

Genetically modified (GM) mice are widely used in biomedical research because they can address complex questions in an in-vivo setting that could not otherwise be addressed in-vitro. Microinjection of zygotes remains the most common technique to generate GM animals to date. Here, we describe the targeted insertion (knock-in) of transgenes by microinjection of 1-cell or 2-cell stage embryos into the murine Rosa26 safe harbor.

摘要

转基因(GM)小鼠被广泛应用于生物医学研究,因为它们可以在体内环境中解决无法在体外解决的复杂问题。到目前为止,向受精卵进行显微注射仍然是最常见的产生 GM 动物的技术。在这里,我们描述了通过将 1 细胞期或 2 细胞期胚胎显微注射到小鼠 Rosa26 安全港中来进行转基因的靶向插入(基因敲入)。

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