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延胡索酸分支酸合酶编码cDNA的分子克隆与分析 注:延胡索酸分支酸合酶(chorismate synthase)是一种在植物代谢途径中发挥重要作用的酶,它参与芳香族氨基酸的生物合成过程。延胡索酸(fumarate)和分支酸(chorismate)是该酶催化反应中的关键底物和产物。 “Corydalis sempervirens Pers.”是一种植物的学名,其中“Corydalis”是属名,意为紫堇属;“sempervirens”表示常绿的;“Pers.”是命名人Persoon的缩写。 这段文本描述了对来自延胡索(Corydalis sempervirens Pers.)这种高等植物的分支酸合酶编码cDNA进行分子克隆和分析的研究工作。分子克隆是指通过一系列实验技术,将特定的DNA片段从一个生物体中分离出来,并在体外进行扩增和复制,以便进一步研究其结构和功能。分析则包括对克隆得到的cDNA进行测序、序列比对、功能预测等,以深入了解分支酸合酶的基因特性和生物学功能。 这样的研究对于揭示植物中芳香族氨基酸生物合成的分子机制、植物的生长发育调控以及应对环境胁迫等方面具有重要意义。通过对分支酸合酶基因的研究,可以为进一步改良植物的代谢途径、提高植物的抗逆性和品质提供理论基础。 在实际研究中,还可能涉及到与其他物种的分支酸合酶基因进行比较,以探讨进化关系和功能差异。此外,对该基因的表达调控研究也是一个重要方面,了解其在不同组织、不同发育阶段以及不同环境条件下的表达模式,有助于深入理解其生物学功能的实现机制。 总之,对延胡索酸分支酸合酶编码cDNA的分子克隆与分析是植物分子生物学领域的一项重要研究工作,为我们深入了解植物的生理代谢过程提供了重要的信息。

Molecular cloning and analysis of a cDNA coding for chorismate synthase from the higher plant Corydalis sempervirens Pers.

作者信息

Schaller A, Schmid J, Leibinger U, Amrhein N

机构信息

Institute of Plant Sciences, Federal Institute of Technology Zürich, Switzerland.

出版信息

J Biol Chem. 1991 Nov 15;266(32):21434-8.

PMID:1718979
Abstract

Chorismate synthase catalyzes the last common step in the biosynthesis of the three aromatic amino acids in microorganisms and plants. We have cloned a cDNA for this enzyme from the higher plant Corydalis sempervirens. This is the first chorismate synthase cDNA from a eukaryotic organism. The nucleotide sequence was determined and the identity of the cDNA was confirmed by the amino acid sequence of tryptic peptides obtained from purified chorismate synthase. The homology to the two known bacterial sequences is about 48%. The cDNA contains an open reading frame of 1341 base pairs, encoding a protein of 447 amino acids. This protein with a molecular mass of 48,100 daltons resembles a chorismate synthase precursor targeted for chloroplast import. Multiple sites of polyadenylation were observed in chorismate synthase mRNAs.

摘要

分支酸合酶催化微生物和植物中三种芳香族氨基酸生物合成的最后一个共同步骤。我们从高等植物延胡索中克隆了该酶的cDNA。这是来自真核生物的第一个分支酸合酶cDNA。测定了核苷酸序列,并通过从纯化的分支酸合酶获得的胰蛋白酶肽的氨基酸序列证实了该cDNA的身份。与两个已知细菌序列的同源性约为48%。该cDNA包含一个1341个碱基对的开放阅读框,编码一个447个氨基酸的蛋白质。这种分子量为48,100道尔顿的蛋白质类似于靶向叶绿体导入的分支酸合酶前体。在分支酸合酶mRNA中观察到多个聚腺苷酸化位点。

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