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改进用于检测融合蛋白的细菌双杂交载体,并转移至pBAD-串联亲和纯化、钙调蛋白结合肽或6-组氨酸标签载体。

Improvement of bacterial two-hybrid vectors for detection of fusion proteins and transfer to pBAD-tandem affinity purification, calmodulin binding peptide, or 6-histidine tag vectors.

作者信息

Battesti Aurélia, Bouveret Emmanuelle

机构信息

Laboratoire d'Ingénierie des Systèmes Macromoléculaires (LISM), CNRS, Marseille, France.

出版信息

Proteomics. 2008 Nov;8(22):4768-71. doi: 10.1002/pmic.200800270.

Abstract

The original vectors of the bacterial two-hybrid technique developed by Karimova et al. in 1998 did not enable detection of the recombinant proteins. Here, we propose two methods resolving this problem, either using new plasmids containing the Flag epitope, or using a trick to detect the T18 domain of adenylate cyclase. Furthermore, we describe a set of vectors for TAP, CBP or 6-histidine tagging that possess the same cloning site as our two-hybrid vectors.

摘要

卡里莫娃等人于1998年开发的细菌双杂交技术的原始载体无法检测重组蛋白。在此,我们提出两种解决该问题的方法,要么使用含有Flag表位的新质粒,要么使用一种技巧来检测腺苷酸环化酶的T18结构域。此外,我们描述了一组用于TAP、CBP或6-组氨酸标签的载体,它们具有与我们的双杂交载体相同的克隆位点。

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