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来自古火球菌的CTP:肌醇-1-磷酸胞苷转移酶的生产、结晶及初步X射线分析。

Production, crystallization and preliminary X-ray analysis of CTP:inositol-1-phosphate cytidylyltransferase from Archaeoglobus fulgidus.

作者信息

Brito José A, Borges Nuno, Santos Helena, Archer Margarida

机构信息

Instituto de Tecnologia Química e Biológica, Universidade Nova de Lisboa, Avenida da República, EAN, 2780-157 Oeiras, Portugal.

出版信息

Acta Crystallogr Sect F Struct Biol Cryst Commun. 2010 Nov 1;66(Pt 11):1463-5. doi: 10.1107/S1744309110032677. Epub 2010 Oct 28.

Abstract

Archaeoglobus fulgidus, a hyperthermophilic archaeon, accumulates di-myo-inositol phosphate (DIP) in response to heat stress. Recently, the pathway for biosynthesis of DIP has been elucidated in this organism and involves a bifunctional enzyme that contains two domains: CTP:inositol-1-phosphate cytidylyltransferase (IPCT) as a soluble domain and di-myo-inositol-1,3'-phosphate-1-phosphate synthase (DIPPS) as a membrane domain. Here, the expression, purification, crystallization and preliminary X-ray diffraction analysis of the IPCT domain from A. fulgidus in the apo form are reported. The crystals diffracted to 2.4 Å resolution using a synchrotron source and belonged to the orthorhombic space group P2(1)2(1)2, with unit-cell parameters a = 154.7, b = 83.9, c = 127.7 Å.

摘要

嗜热栖热菌(Archaeoglobus fulgidus)是一种嗜热古菌,在热应激条件下会积累二 - 肌醇磷酸(DIP)。最近,该生物体中DIP的生物合成途径已被阐明,涉及一种双功能酶,它包含两个结构域:作为可溶性结构域的CTP:肌醇 - 1 - 磷酸胞苷转移酶(IPCT)和作为膜结构域的二 - 肌醇 - 1,3'-磷酸 - 1 - 磷酸合酶(DIPPS)。本文报道了嗜热栖热菌中IPCT结构域无配体形式的表达、纯化、结晶及初步X射线衍射分析。使用同步辐射源,晶体衍射分辨率达到2.4 Å,属于正交晶系空间群P2(1)2(1)2,晶胞参数a = 154.7,b = 83.9,c = 127.7 Å。

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