Department of Animal Science, The University of Sydney; Department of Animal Health, The University of Sydney, Camden and C.S.I.R.O., Division of Animal Health, McMaster Laboratory, PMB, Glebe, Australia.
J Anim Breed Genet. 1993 Jan 12;110(1-6):321-34. doi: 10.1111/j.1439-0388.1993.tb00745.x.
Restriction fragment length polymorphism (RFLP) within the Major Histocompatibility Complex (MHC) Class II region was examined in 83 sheep. Two restriction enzymes (TaqI and PvuII) and two human cDNA probes (DQα-folke and DRβ-malta) were used to probe Southern blots from all sheep. In addition, a second human DRβ probe (signe) and the restriction enzyme, EcoRI, were used for 15 sheep to match previously published polymorphism in sheep using the same probe/enzyme combination. All sheep were part of an experiment in which footrot was experimentally induced and then controlled through vaccination with an homologous rDNA pilus vaccine. The four main probe/enzyme combinations detected extensive polymorphism; in total 74 bands were detected of which only 2 were present in all sheep. A similar level of polymorphism was also seen with the EcoRI/DRβ-signe probe/enzyme combination, which was greater than previously published for sheep, cattle or goats. After accounting for cross-hybridising bands, the sheep DRβ region appeared to be more polymorphic than the DQα region. Similarly the TaqI restriction enzyme revealed more polymorphism than the PvuI enzyme (40 and 34 bands respectively). For all 74 bands, 7 main clusters were identified both within and across probe/enzyme combinations. After removing bands/clusters which were of extreme frequency (< 0.10 and > 0.90), a total of 53 bands/clusters were analysed for their potential association with footrot and antibody responses. One band was significantly associated with susceptibility to footrot over the 27-week period during which footrot was measured. In addition, two single bands and one cluster were significantly (P > 0.001) associated with residual footrot infection after vaccination. Nine bands/clusters were associated with antibody titre during infection, and one cluster with antibody titre after vaccination. These results suggest a possible involvement for genetic polymorphism within the ovine Class II region in variation in response to footrot. ZUSAMMENFASSUNG: Krankheitsresistenz bei Merinos, II. RFLP's in Klasse II MHC und ihre Verbindung mit der Moderhinkeresistenz Restriktionsfragmentlängenpolymorphismus (RFLP) innerhalb des Haupthistokompatibilitätskomplexes (MHC) Klasse II Region wurde bei 83 Schafen untersucht. Zwei Restriktionsenzyme (TaqI und PvuII) und zwei humane cDNA-Sonden (DQα-folke und DRβ-malta) wurden für Southern blots bei allen Schafen verwendet. Zusätzlich wurde eine zweite humane DRβ-Sonde (signe) und das Restriktionsenzym EcoRI bei 15 Schafen zum Vergleich mit früher publizierten Polymorphismus mit den selben Enzym/Sondenkombinationen durchgeführt. Alle Schafe waren Teil eines Versuches, in welchem Moderhinke experimentell induziert und dann durch Vaccination mit homologer rDNA-pilus vaccine bekämpft worden war. Die 4 Enzym/Sondenkombinationen entdeckten extensiven Polymorphismus. Insgesamt 74 Banden wurden entdeckt, wovon nur zwei in allen Schafen vorhanden waren. Ein ähnliches Ausmaß von Polymorphismus wurde auch mit der EcoRI/DRβ-signe Enzym/Sondenkombination entdeckt, das größer war als bisher für Schafe, Rinder oder Ziegen publiziert. Nach Berücksichtigung der Kreuz-Hybridisierungsbande scheint die Schaf-DRβ-Region stärker polymorph als die DQα-Region zu sein. Ähnlicherweise zeigte das TaqI Restriktionsenzym mehr Polymorphismus als das PvuII Enzym (40 bzw. 34 Bande). Bei allen 74 Banden wurden sieben Hauptkluster identifiziert, sowohl innerhalb als auch über Enzym/Sondenkombinationen. Nach Entfernung von Banden/Kluster mit extremen Häufigkeiten (< 0,10 bzw. > 0.9) wurden insgesamt 53 Bande/Kluster hinsichtlich ihrer potentiellen Verbindung mit Moderhinke und Antikörperreaktion analysiert. Ein Band war signifikant mit Moderhinkeempfindlichkeit während der 27-Wochenperiode assoziiert. Zusätzlich waren zwei einzelne Bande und ein Kluster signifikant (p > 0,001) assoziiert mit Moderhinkeinfektion nach der Impfung. 9 Band/Kluster waren mit Antikörperspiegel während der Infektion verbunden und ein Kluster mit Antikörperspiegel nach Impfung. Die Ergebnisse deuten auf Zusammenhang des genetischen Polymorphismus innerhalb der ovinen Klasse II-Region mit Variabilität im Moderhinkeverlauf.
限制片段长度多态性（RFLP）在主要组织相容性复合体（MHC）II 区在 83 只羊中进行了检查。使用两种限制酶（TaqI 和 PvuII）和两种人类 cDNA 探针（DQα-folke 和 DRβ-malta）来探测所有绵羊的 Southern 印迹。此外，使用第二种人类 DRβ探针（signe）和限制酶 EcoRI 对 15 只绵羊进行了检测，以匹配先前使用相同探针/酶组合在绵羊中发表的多态性。所有绵羊均参与了一项实验，在该实验中，通过同源 rDNA 菌毛疫苗接种来实验性地诱导和控制腐蹄病。四种主要的探针/酶组合检测到广泛的多态性；总共检测到 74 条带，其中只有 2 条存在于所有绵羊中。用 EcoRI/DRβ-signe 探针/酶组合检测到的多态性也与绵羊、牛或山羊以前发表的多态性相似。在考虑到交叉杂交带后，绵羊 DRβ 区域似乎比 DQα 区域多态性更高。同样，TaqI 限制酶显示出比 PvuI 酶更多的多态性（分别为 40 和 34 条带）。对于所有 74 条带，在探针/酶组合内部和之间共鉴定出 7 个主要簇。去除频率极低（<0.10 和>0.90）和极高的带/簇后，共分析了 53 个带/簇，以研究它们与腐蹄病和抗体反应的潜在关联。有一条带与 27 周的腐蹄病测量期间的腐蹄病易感性显著相关。此外，两个单带和一个簇与接种后腐蹄病感染的残余感染显著相关（P>0.001）。9 个带/簇与感染期间的抗体滴度相关，一个簇与接种后的抗体滴度相关。这些结果表明，绵羊 II 类区的遗传多态性可能与腐蹄病的反应变异性有关。
