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鼠伤寒沙门氏菌asd基因的克隆与特性分析:用于沙门氏菌疫苗株中重组质粒的稳定维持

Cloning and characterization of the asd gene of Salmonella typhimurium: use in stable maintenance of recombinant plasmids in Salmonella vaccine strains.

作者信息

Galán J E, Nakayama K, Curtiss R

机构信息

Department of Biology, Washington University, Saint Louis, MO 63130.

出版信息

Gene. 1990 Sep 28;94(1):29-35. doi: 10.1016/0378-1119(90)90464-3.

DOI:10.1016/0378-1119(90)90464-3
PMID:2227450
Abstract

The asd mutants of Salmonella typhimurium have an obligate requirement for diaminopimelic acid (DAP) and will undergo lysis in environments deprived of DAP. This has allowed the development of a balanced-lethal system for the expression of heterologous antigens in vaccine strains using vectors containing the wild-type asd gene from Streptococcus mutans and asd mutant Salmonella hosts [Nakayama et al., Biotechnology 6 (1988) 693-697]. We have cloned the asd gene from S. typhimurium, characterized the gene product and used this gene to construct Asd+ expression cloning vectors. In addition we have constructed an asd cassette and a transposon derived from Tn5 that allow the rapid modification of other vectors for use with delta asd vaccine strains of S. typhimurium adding versatility to the Asd+ vector/delta asd host system of plasmid maintenance.

摘要

鼠伤寒沙门氏菌的 asd 突变体对二氨基庚二酸(DAP)有绝对需求,并且在缺乏 DAP 的环境中会发生裂解。这使得利用含有变形链球菌野生型 asd 基因的载体和 asd 突变沙门氏菌宿主,在疫苗菌株中表达异源抗原的平衡致死系统得以发展[中山等人,《生物技术》6(1988)693 - 697]。我们已经从鼠伤寒沙门氏菌中克隆了 asd 基因,对基因产物进行了表征,并使用该基因构建了 Asd⁺表达克隆载体。此外,我们构建了一个 asd 盒式结构和一个源自 Tn5 的转座子,它们能够快速修饰其他载体,以便与鼠伤寒沙门氏菌的Δasd 疫苗菌株一起使用,从而增加了 Asd⁺载体/Δasd 宿主质粒维持系统的通用性。

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