Centre for Infection and Immunity, Queen’s University Belfast, Health Sciences Building, Belfast, UK.
Am J Physiol Cell Physiol. 2012 Dec 1;303(11):C1173-9. doi: 10.1152/ajpcell.00384.2011. Epub 2012 Sep 26.
Cultured primary epithelial cells are used to examine inflammation in cystic fibrosis (CF). We describe a new human model system using cultured nasal brushings. Nasal brushings were obtained from 16 F508del homozygous patients and 11 healthy controls. Cells were resuspended in airway epithelial growth medium and seeded onto collagen-coated flasks and membranes for use in patch-clamp, ion transport, and mediator release assays. Viable cultures were obtained with a 75% success rate from subjects with CF and 100% from control subjects. Amiloride-sensitive epithelial Na channel current of similar size was present in both cell types while forskolin-activated CF transmembrane conductance regulator current was lacking in CF cells. In Ussing chambers, cells from CF patients responded to UTP but not to forskolin. Spontaneous and cytomix-stimulated IL-8 release was similar (stimulated 29,448 ± 9,025 pg/ml; control 16,336 ± 3,308 pg/ml CF; means ± SE). Thus nasal epithelial cells from patients with CF can be grown from nasal brushings and used in electrophysiological and mediator release studies in CF research.
培养的原代上皮细胞用于研究囊性纤维化（CF）中的炎症。我们描述了一种使用培养的鼻刷的新的人类模型系统。从 16 名 F508del 纯合子患者和 11 名健康对照者中获得了鼻刷。将细胞悬浮在气道上皮细胞生长培养基中，并接种到涂有胶原蛋白的培养瓶和膜上，用于进行膜片钳、离子转运和介质释放测定。CF 患者的培养成功率为 75%，对照组为 100%。两种细胞类型均存在大小相似的阿米洛利敏感的上皮钠通道电流，而 CF 细胞中缺乏福斯柯林激活的 CF 跨膜电导调节剂电流。在 Ussing 室中，来自 CF 患者的细胞对 UTP 有反应，但对福斯柯林无反应。自发性和细胞因子刺激的 IL-8 释放相似（刺激后 29448 ± 9025 pg/ml；CF 对照组为 16336 ± 3308 pg/ml；平均值 ± SE）。因此，CF 患者的鼻上皮细胞可以从鼻刷中培养出来，并用于 CF 研究中的电生理和介质释放研究。
培养的原代上皮细胞用于研究囊性纤维化（CF）中的炎症。我们描述了一种使用培养的鼻刷的新的人类模型系统。从 16 名 F508del 纯合子患者和 11 名健康对照者中获得了鼻刷。将细胞悬浮在气道上皮细胞生长培养基中，并接种到涂有胶原蛋白的培养瓶和膜上，用于进行膜片钳、离子转运和介质释放测定。CF 患者的培养成功率为 75%，对照组为 100%。两种细胞类型均存在大小相似的阿米洛利敏感的上皮钠通道电流，而 CF 细胞中缺乏福斯柯林激活的 CF 跨膜电导调节剂电流。在 Ussing 室中，来自 CF 患者的细胞对 UTP 有反应，但对福斯柯林无反应。自发性和细胞因子刺激的 IL-8 释放相似（刺激后 29448 ± 9025 pg/ml；CF 对照组为 16336 ± 3308 pg/ml；平均值 ± SE）。因此，CF 患者的鼻上皮细胞可以从鼻刷中培养出来，并用于 CF 研究中的电生理和介质释放研究。
将“CF 患者”与“对照组”的身份与细胞类型分别列出，更易于理解。
培养的原代上皮细胞用于研究囊性纤维化（CF）中的炎症。我们描述了一种使用培养的鼻刷的新的人类模型系统。从 16 名 F508del 纯合子 CF 患者和 11 名健康对照者中获得了鼻刷。将细胞悬浮在气道上皮细胞生长培养基中，并接种到涂有胶原蛋白的培养瓶和膜上，用于进行膜片钳、离子转运和介质释放测定。CF 患者的培养成功率为 75%，对照组为 100%。两种细胞类型均存在大小相似的阿米洛利敏感的上皮钠通道电流，而 CF 细胞中缺乏福斯柯林激活的 CF 跨膜电导调节剂电流。在 Ussing 室中，来自 CF 患者的细胞对 UTP 有反应，但对福斯柯林无反应。自发性和细胞因子刺激的 IL-8 释放相似（刺激后 29448 ± 9025 pg/ml；CF 对照组为 16336 ± 3308 pg/ml；平均值 ± SE）。因此，CF 患者的鼻上皮细胞可以从鼻刷中培养出来，并用于 CF 研究中的电生理和介质释放研究。
