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构建同源和异源合成蔗糖利用模块及其在重组大肠杆菌中类胡萝卜素生产中的应用。

Construction of homologous and heterologous synthetic sucrose utilizing modules and their application for carotenoid production in recombinant Escherichia coli.

机构信息

Department of Molecular Science and Technology, Ajou University, Woncheon-dong, Yeongtong-gu, Suwon 443-749, Republic of Korea.

出版信息

Bioresour Technol. 2013 Feb;130:288-95. doi: 10.1016/j.biortech.2012.11.148. Epub 2012 Dec 13.

DOI:10.1016/j.biortech.2012.11.148
PMID:23313673
Abstract

Sucrose is one of the most promising carbon sources for industrial fermentation. We expressed synthetic modules expressing genes of the PEP-PTS and non-PTS pathways in Escherichia coli K12 for comparison. We selected PEP-PTS pathway genes of Lactobacillus plantarum and Staphylococcus xylosus and non-PTS pathway genes of sucrose-utilizing (Scr(+)) E. coli EC3132. Switchable Scr(+) modules expressing E. coli EC3132 non-PTS genes conferred better sucrose-utilizing ability on Scr(-)E. coli K12 than E. coli EC3132. Scr(+) modules expressing S. xylosus PEP-PTS genes conferred a sucrose-utilizing ability on E. coli K12. Among L. plantarum PEP-PTS genes, SacA(LP) and SacK(LP) were functional in E. coli K12. CscA(EC)-CscB(EC)-CscK(EC) (non-PEP-PTS module) or ScrA(SX)-SacA(LP)-SacK(LP) (PEP-PTS module) was introduced to a diapolycopene-producing E. coli strain. In both Scr(+)E. coli K12, the sucrose-utilizing ability of the modules was not affected by diapolycopene formation, indicating that the modular Scr(+) systems could be employed for developing sustainable bioprocesses using sucrose.

摘要

蔗糖是工业发酵最有前途的碳源之一。我们在大肠杆菌 K12 中表达了表达 PEP-PTS 和非 PTS 途径基因的合成模块进行比较。我们选择了植物乳杆菌和葡萄球菌木糖亚种的 PEP-PTS 途径基因和利用蔗糖(Scr(+))的大肠杆菌 EC3132 的非 PTS 途径基因。表达大肠杆菌 EC3132 非 PTS 基因的可切换 Scr(+)模块赋予 Scr(-)大肠杆菌 K12 比大肠杆菌 EC3132 更好的蔗糖利用能力。表达葡萄球菌木糖亚种 PEP-PTS 基因的 Scr(+)模块赋予了大肠杆菌 K12 蔗糖利用能力。在植物乳杆菌的 PEP-PTS 基因中,SacA(LP)和 SacK(LP)在大肠杆菌 K12 中具有功能。CscA(EC)-CscB(EC)-CscK(EC)(非 PEP-PTS 模块)或 ScrA(SX)-SacA(LP)-SacK(LP)(PEP-PTS 模块)被引入二氢番茄红素生产大肠杆菌菌株。在两种 Scr(+)大肠杆菌 K12 中,模块的蔗糖利用能力不受二氢番茄红素形成的影响,表明模块化 Scr(+)系统可用于开发利用蔗糖的可持续生物工艺。

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