Department of Respiratory Medicine, The First People's Hospital of Lianyungang City, Lianyungang, Jiangsu 222002, P.R. China.
Department of Respiratory Medicine, The Affiliated Hospital of Xuzhou Medical University, Xuzhou, Jiangsu 221004, P.R. China.
Mol Med Rep. 2018 Aug;18(2):2321-2327. doi: 10.3892/mmr.2018.9213. Epub 2018 Jun 22.
Subunit 1 is the scaffold protein of the carbon catabolite repressor protein 4 (CCR4)‑negative on TATA (NOT) complex (CNOT1). In our previous study, it was reported that tristetraprolin (TTP) could recruit subunit 7 of the CCR4‑NOT complex (CNOT7) to induce the degradation of intercellular adhesion molecule‑1 (ICAM‑1) and interleukin‑8 (IL‑8) mRNA in human pulmonary microvascular endothelial cells (HPMECs). It was additionally demonstrated that TTP, CNOT7 and CNOT1 formed a complex in HPMECs. However, whether CNOT1 is involved in TTP‑mediated ICAM‑1 and IL‑8 mRNA decay remains unclear. The present study demonstrated that CNOT1 knockdown improved ICAM‑1 and IL‑8 mRNA stabilization and protein expression levels. The immunofluorescence results demonstrated that CNOT1, CNOT7 and TTP are co‑localized in the cytoplasm. CNOT1 silencing abolished CNOT7 and TTP coimmunoprecipitation. However, CNOT7 silencing did not influence CNOT1 and TTP coimmunoprecipitation, and TTP silencing additionally did not influence CNOT1 and CNOT7 coimmunoprecipitation. These results together with the authors' previous study, have identified that CNOT1 provides a platform for the recruitment of TTP and CNOT7, and is involved in TTP‑mediated ICAM‑1 and IL‑8 mRNA decay.
亚基 1 是碳分解代谢物阻遏物蛋白 4（CCR4）-TATA（NOT）复合物（CNOT1）的支架蛋白。在我们之前的研究中，报道了 tristetraprolin（TTP）可以募集 CCR4-NOT 复合物的亚基 7（CNOT7），从而诱导人肺微血管内皮细胞（HPMECs）中细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和白细胞介素-8（IL-8）mRNA 的降解。此外还表明 TTP、CNOT7 和 CNOT1 在 HPMECs 中形成复合物。然而，CNOT1 是否参与 TTP 介导的 ICAM-1 和 IL-8 mRNA 降解尚不清楚。本研究表明，CNOT1 敲低可改善 ICAM-1 和 IL-8 mRNA 的稳定性和蛋白表达水平。免疫荧光结果表明 CNOT1、CNOT7 和 TTP 在细胞质中共定位。CNOT1 沉默消除了 CNOT7 和 TTP 的共免疫沉淀。然而，CNOT7 沉默不影响 CNOT1 和 TTP 的共免疫沉淀，TTP 沉默也不影响 CNOT1 和 CNOT7 的共免疫沉淀。这些结果与作者之前的研究一起，确定了 CNOT1 为 TTP 和 CNOT7 的募集提供了一个平台，并参与了 TTP 介导的 ICAM-1 和 IL-8 mRNA 降解。
