Novo Nordisk A/S, Novo Nordisk Park 1, DK-2760 Måløv, Denmark.
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Biochemistry. 2020 Apr 14;59(14):1410-1419. doi: 10.1021/acs.biochem.0c00019. Epub 2020 Mar 30.
Somapacitan, a human growth hormone derivative that binds reversibly to albumin, was investigated for human serum albumin (HSA) and HSA domain binding. Isothermal titration calorimetry (ITC) binding profiles showed high-affinity binding (∼100-1000 nM) of one somapacitan molecule and low-affinity binding (∼1000-10000 nM) of one to two somapacitan molecules to HSA. The high-affinity site was identified in HSA domain III using size exclusion chromatography (SEC) and ITC. SEC studies showed that the neonatal Fc receptor shields one binding site for somapacitan, indicating its position in domain III. A crystal structure of somapacitan in complex with HSA optimized for neonatal Fc receptor binding, having four amino acid residue replacements, identified a low-affinity site in fatty acid-binding site 6 (domain II). Surface plasmon resonance (SPR) showed these replacements affect the kinetics of the high-affinity binding site. Furthermore, small-angle X-ray scattering and SPR brace two somapacitan-binding sites on HSA.
索马帕肽是一种与人血清白蛋白（HSA）结合的生长激素衍生物，可与白蛋白可逆结合，用于研究 HSA 与 HSA 结构域的结合。等温滴定量热法（ITC）的结合谱显示，一个索马帕肽分子与 HSA 具有高亲和力结合（∼100-1000 nM），而一个至两个索马帕肽分子与 HSA 具有低亲和力结合（∼1000-10000 nM）。使用尺寸排阻色谱（SEC）和 ITC 鉴定出 HSA 结构域 III 中的高亲和力结合位点。SEC 研究表明，新生儿 Fc 受体掩盖了索马帕肽的一个结合位点，表明其在结构域 III 中的位置。为了优化与新生儿 Fc 受体的结合，对索马帕肽与 HSA 的复合物进行了晶体结构优化，有四个氨基酸残基被替换，确定了脂肪酸结合位点 6（结构域 II）中的一个低亲和力结合位点。表面等离子体共振（SPR）表明这些替换影响了高亲和力结合位点的动力学。此外，小角度 X 射线散射和 SPR 确定了 HSA 上的两个索马帕肽结合位点。
