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通过CRISPR技术创建功能性基因敲入。

Creation of a functional knock-in by CRISPR.

作者信息

Gallegos Maria, Hermes Alex, Patra Debjani

机构信息

California State University, East Bay.

出版信息

MicroPubl Biol. 2021 Apr 28;2021. doi: 10.17912/micropub.biology.000389.

DOI:10.17912/micropub.biology.000389
PMID:33937722
原文链接:https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC8082290/
Abstract

is the only ortholog of mammalian PICALM/AP180, paralogs that play an important role in Clathrin-Mediated Endocytosis (CME) and the recycling of a subset of SNAREs, the vesicle-associated membrane proteins (VAMPs). In this publication we report the creation of a new allele that is endogenously-tagged with GFP just upstream of the stop codon. Moreover, we demonstrate that the UNC-11::GFP fusion protein functions like wild type with an expression pattern similar to UNC-11 antibody staining described previously.

摘要

它是哺乳动物PICALM/AP180的唯一直系同源物,这些旁系同源物在网格蛋白介导的内吞作用(CME)以及SNAREs(囊泡相关膜蛋白,VAMPs)的一个子集的循环利用中发挥重要作用。在本出版物中,我们报告了一个新等位基因的创建,该等位基因在终止密码子上游被内源性标记了绿色荧光蛋白(GFP)。此外,我们证明UNC-11::GFP融合蛋白的功能与野生型相似,其表达模式与先前描述的UNC-11抗体染色相似。

https://cdn.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/blobs/0ad0/8082290/8e3eee1b09bf/25789430-2021-micropub.biology.000389.jpg
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