Universidad de Buenos Aires, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Departamento de Química Orgánica, Buenos Aires, Argentina.
CONICET-Universidad de Buenos Aires, Unidad de Microanálisis y Métodos Físicos Aplicados a la Química Orgánica (UMYMFOR), Buenos Aires, Argentina.
Methods Mol Biol. 2022;2525:173-183. doi: 10.1007/978-1-0716-2473-9_12.
Protein-protein interactions (PPIs) play central roles in most molecular mechanisms underlying cellular and biological processes. Within the methods developed to study PPIs is bioluminescence resonance energy transfer (BRET). Taking advantage of this technique, we have set a BRET-based assay that enables the screening of modulators of essential PPIs for Trypanosoma cruzi survival. Considering the complexity of the evaluated mixture, pure chemical compounds or natural extracts, two approaches are described, BRET in living cells or from lysates.
蛋白质-蛋白质相互作用 (PPIs) 在大多数细胞和生物过程的分子机制中起着核心作用。在研究 PPIs 的方法中，生物发光共振能量转移 (BRET) 是其中之一。利用这项技术，我们建立了一种基于 BRET 的检测方法，可以筛选出对生存至关重要的 Trypanosoma cruzi PPI 的调节剂。考虑到所评估混合物的复杂性，包括纯化学化合物或天然提取物，描述了两种方法，即活细胞内的 BRET 或从细胞裂解物中的 BRET。
