Cardin A D, Hirose N, Blankenship D T, Jackson R L, Harmony J A, Sparrow D A, Sparrow J T
Biochem Biophys Res Commun. 1986 Jan 29;134(2):783-9. doi: 10.1016/s0006-291x(86)80489-2.
Ligand-blotting and dot-blotting procedures were used to investigate the binding of [125I]-heparin to apolipoprotein E, its thrombin fragments E22 (residues 1-191) and E12 (residues 192-299), and to nine apolipoprotein E synthetic fragments. E22 and E12 bound [125I] heparin indicating multiple heparin-binding domains. Synthetic peptides of apoE corresponding to residues 129-169, 139-169, and 144-169, but not 148-169, bound [125I] heparin suggesting that residues 144-147 (Leu-Arg-Lys-Arg) in E22 are important for binding. Peptide 202-243 and 211-243 but not 219-243 bound [125I] heparin suggesting that residues 211-218 (Gly-Glu-Arg-Leu-Arg-Ala-Arg-Met) comprise a portion of the E12 heparin-binding domain.
采用配体印迹法和斑点印迹法研究了[125I] -肝素与载脂蛋白E、其凝血酶片段E22(第1 - 191位氨基酸残基)和E12(第192 - 299位氨基酸残基)以及9种载脂蛋白E合成片段的结合情况。E22和E12结合了[125I] -肝素,表明存在多个肝素结合结构域。对应于第129 - 169、139 - 169和144 - 169位氨基酸残基(而非148 - 169位氨基酸残基)的载脂蛋白E合成肽段结合了[125I] -肝素,提示E22中第144 - 147位氨基酸残基(亮氨酸 - 精氨酸 - 赖氨酸 - 精氨酸)对结合很重要。肽段202 - 243和211 - 243(而非219 - 243)结合了[125I] -肝素,提示第211 - 218位氨基酸残基(甘氨酸 - 谷氨酸 - 精氨酸 - 亮氨酸 - 精氨酸 - 丙氨酸 - 精氨酸 - 甲硫氨酸)构成了E12肝素结合结构域的一部分。