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用于监测胰腺分化的ARX-T2A-H2B-CFP×C-PEP-mCherry人诱导多能干细胞双报告基因系的构建

Generation of ARX-T2A-H2B-CFP x C-PEP-mCherry-hiPSC double reporter line for monitoring of pancreatic differentiation.

作者信息

Setyono Eunike Sawitning Ayu, Rogers Nicole Katarina, Hofmann Anita, Lickert Heiko, Burtscher Ingo

机构信息

Institute of Diabetes and Regeneration Research, Helmholtz Munich, 85764 Neuherberg, Germany; Technical University Munich 81675 Munich, Germany; German Center for Diabetes Research (DZD), 85764 Neuherberg, Germany.

Institute of Diabetes and Regeneration Research, Helmholtz Munich, 85764 Neuherberg, Germany.

出版信息

Stem Cell Res. 2025 Apr;84:103685. doi: 10.1016/j.scr.2025.103685. Epub 2025 Feb 15.

DOI:10.1016/j.scr.2025.103685
PMID:40022904
Abstract

Pancreatic islets consist of several different endocrine cell types that work in harmony. Aside from primary pancreatic islets, stem cell-derived pancreatic islets can be used as an alternative research and disease model. Here, we introduce a double reporter line of ARX-T2A-H2B-CFP x C-PEP-mCherry-hiPSC through CRISPR/Cas9-mediated insertion of mCherry in the C-terminus of C-Peptide in the previously published ARX-CFP hiPSC line. This reporter line allows live monitoring of stem cell-derived pancreatic alpha and beta cells throughout differentiation.

摘要

胰岛由几种协同工作的不同内分泌细胞类型组成。除了原代胰岛外,干细胞衍生的胰岛可用作替代研究和疾病模型。在这里,我们通过CRISPR/Cas9介导的mCherry插入到先前发表的ARX-CFP hiPSC系中C肽的C末端,构建了ARX-T2A-H2B-CFP×C-PEP-mCherry-hiPSC双报告基因系。该报告基因系能够在整个分化过程中对干细胞衍生的胰腺α细胞和β细胞进行实时监测。

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