Wanikiat P, Woodward D F, Armstrong R A
Department of Pharmacology, University of Edinburgh.
Br J Pharmacol. 1997 Nov;122(6):1135-45. doi: 10.1038/sj.bjp.0701477.
本研究的目的是通过使用一氧化氮（NO）和环鸟苷酸（cGMP）途径的选择性抑制剂，确定NO和cGMP在人中性粒细胞趋化性和超氧阴离子生成（SAG）中的作用。此外，还研究了NO释放化合物对中性粒细胞趋化性的抑制作用以及中性粒细胞硝酸盐/亚硝酸盐和cGMP水平的升高情况。这项工作的最终目的是解决NO既能激活又能抑制人中性粒细胞这一矛盾。2. NO作为N-甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸（fMLP）诱导趋化性的介质的作用得到了以下发现的支持：NO合酶（NOS）抑制剂L-NMMA（500 microM）抑制趋化性；有和没有L-NMMA时，fMLP的EC50分别为28.76±5.62和41.13±4.77 pmol/10(6)细胞。同样，NO清除剂羧基-PTIO（100 microM）也抑制趋化性；有和没有羧基-PTIO时，fMLP的EC50分别为19.71±4.23和31.68±8.50 pmol/10(6)细胞。 3. cGMP作为趋化性介质的作用得到了以下发现的支持：鸟苷酸环化酶抑制剂LY 83583（100 microM）完全抑制趋化性并抑制最大反应；有和没有LY 83583时，fMLP的EC50分别为32.53±11.18和85.21±15.14 pmol/10(6)细胞。G激酶抑制剂KT 5823（10 microM）也观察到了相同的抑制模式；有和没有KT 5823时，fMLP的EC50分别为32.16±11.35和>135 pmol/10(6)细胞。4. 抑制磷脂酶D的磷酸酶抑制剂2,3-二磷酸甘油酸（DPG）（100 microM）减弱了fMLP诱导的趋化性；有和没有DPG时，fMLP的EC50分别为19.15±4.36和61.52±16.2 pmol/10(6)细胞。5. 尽管NOS抑制剂L-NMMA和L-刀豆氨酸（500 microM）未能抑制fMLP诱导的SAG，但羧基-PTIO引起了显著抑制（有和没有羧基-PTIO时，fMLP的EC50分别为36.15±7.43和86.31±14.06 nM，并将最大反应从22.14±1.5降至9.8±1.6 nmol O2-/10(6)细胞/10分钟）。这表明NO是fMLP诱导的SAG的介质。6. G激酶抑制剂KT 5823（10 microM）和Rp-8-pCPT-cGMPS（100 microM）对SAG的抑制作用支持了cGMP作为SAG介质的作用，有和没有KT 5823时，fMLP的EC50分别为36.26±8.77和200.01±43.26 nM，有和没有Rp-8-pCTP-cGMPS时，EC50分别为28.35±10.8和49.25±16.79 nM。7. 磷酸酶抑制剂DPG（500 microM）抑制SAG；有和没有DPG时，fMLP的EC50分别为33.93±4.23和61.12±14.43 nM。8. NO释放化合物抑制fMLP诱导的趋化性，其效力顺序为GEA 3162（IC50 = 14.72±1.6 microM）> GEA 5024（IC50 = 18.44±0.43 microM）> SIN-1（IC50>1000 microM）。这种效力顺序与其增加cGMP水平的能力相关，而不是与NO的释放相关，其中SIN-1最有效（SIN-1（EC50 = 37.62±0.9 microM）> GEA 3162（EC50 = 39.7±0.53 microM）> GEA 5024（EC50 = 89.约为86.31±14.06 nM，并将最大反应从22.14±1.5降至9.8±1.6 nmol O2-/10(6)细胞/10分钟）。这表明NO是fMLP诱导的SAG的介质。6. G激酶抑制剂KT 5823（10 microM）和Rp-8-pCPT-cGMPS（100 microM）对SAG的抑制作用支持了cGMP作为SAG介质的作用，有和没有KT 5823时，fMLP的EC50分别为36.26±8.77和200.01±43.26 nM，有和没有Rp-8-pCTP-cGMPS时，EC50分别为28.35±10.8和49.25±16.经上述翻译内容调整后如下：
本研究旨在通过使用一氧化氮（NO）和环鸟苷酸（cGMP）途径的选择性抑制剂，确定NO和cGMP在人中性粒细胞趋化性及超氧阴离子生成（SAG）中的作用。此外，还检测了NO释放化合物对中性粒细胞趋化性的抑制作用，以及中性粒细胞硝酸盐/亚硝酸盐和cGMP水平的升高情况。此项研究最终目的是解决NO既能激活又能抑制人中性粒细胞这一矛盾。
NO作为N-甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸（fMLP）诱导趋化性介质的作用，得到以下发现支持：NO合酶（NOS）抑制剂L-NMMA（500 microM）抑制趋化性；有无L-NMMA时，fMLP的EC50分别为28.76±5.62和41.13±4.77 pmol/10⁶细胞。同样，NO清除剂羧基-PTIO（100 microM）也抑制趋化性；有无羧基-PTIO时，fMLP的EC50分别为19.71±4.23和31.68±8.50 pmol/10⁶细胞。
cGMP作为趋化性介质的作用，得到以下发现支持：鸟苷酸环化酶抑制剂LY 83583（100 microM）完全抑制趋化性并抑制最大反应；有无LY 83583时，fMLP的EC50分别为32.53±11.18和85.21±15.14 pmol/10⁶细胞。G激酶抑制剂KT 5823（10 microM）也呈现相同抑制模式；有无KT 5823时，fMLP的EC50分别为32.16±11.35和>135 pmol/10⁶细胞。
抑制磷脂酶D的磷酸酶抑制剂二磷酸甘油酸（DPG）（100 microM）减弱fMLP诱导的趋化性；有无DPG时，fMLP的EC50分别为19.15±4.36和61.52±16.2 pmol/10⁶细胞。
尽管NOS抑制剂L-NMMA和L-刀豆氨酸（500 microM）未能抑制fMLP诱导的SAG，但羧基-PTIO产生显著抑制（有无羧基-PTIO时，fMLP的EC50分别为36.15±7.43和86.31±14.06 nM，最大反应从22.14±1.5降至9.8±1.6 nmol O₂⁻/10⁶细胞/10分钟）。这表明NO是fMLP诱导的SAG的介质。
G激酶抑制剂KT 5823（10 microM）和Rp-8-pCPT-cGMPS（100 microM）对SAG的抑制作用，支持了cGMP作为SAG介质的作用，有无KT 时，fMLP的EC50分别为²为36.26±8.77和200.01±43.26 nM，有无Rp-8-pCTP-cGMPS时，EC50分别为28.35±10.8和49.25±16.79 nM。
磷酸酶抑制剂DPG（500 microM）抑制SAG；有无DPG时，fMLP的EC50分别为33.93±4.23和61.12±14.43 nM。
NO释放化合物抑制fMLP诱导的趋化性，效力顺序为GEA 3162（IC50 = 14.72±1.6 microM）> GEA 5024（IC50 = 18.44±0.43 microM）> SIN-1（IC50>1000 microM）。该效力顺序与其增加cGMP水平的能力相关，而非与NO释放相关，其中SIN-1最有效（SIN-1（EC50 = 37.62±0.9 microM）> GEA 3162（EC50 = 39.7±0.53 microM）> GEA 5024（EC50 = 89.86±1.62 microM））。
总之，fMLP诱导的趋化性和SAG可被磷脂酶D、NO和cGMP的抑制剂减弱，表明这些物质在中性粒细胞激活中起作用。然而，fMLP诱导的与中性粒细胞激活相关的cGMP和NO增加非常小。相比之下，如NO释放化合物所观察到的，NO和cGMP的大幅增加会抑制趋化性。
86±14.06 nM，并将最大反应从22.14±1.5降至9.8±1.6 nmol O2-/10(6)细胞/10分钟）。这表明NO是fMLP诱导的SAG的介质。6. G激酶抑制剂KT 5823（10 microM）和Rp-8-pCPT-cGMPS（100 microM）对SAG的抑制作用支持了cGMP作为SAG介质的作用，有和没有KT 5823时，fMLP的EC50分别为36.26±8.77和200.01±43.26 nM，有和没有Rp-8-pCTP-cGMPS时，EC50分别为28.35±10.8和49.25±16.79 nM。7. 磷酸酶抑制剂DPG（500 microM）抑制SAG；有和没有DPG时，fMLP的EC50分别为33.93±4.23和61.12±14.43 nM。8. NO释放化合物抑制fMLP诱导的趋化性，其效力顺序为GEA 3162（IC50 = 14.72±1.6 microM）> GEA 5024（IC50 = 18.44±0.43 microM）> SIN-1（IC50>1000 microM）。这种效力顺序与其增加cGMP水平的能力相关，而不是与NO的释放相关，其中SIN-1最有效（SIN-1（EC50 = 37.62±0.9 microM）> GEA 3162（EC50 = 39.7±0.53 microM）> GEA 5024（EC50 = 89.86±1.62 microM））。9. 总之，fMLP诱导的趋化性和SAG可被磷脂酶D、NO和cGMP的抑制剂减弱，表明这些物质在中性粒细胞激活中起作用。然而，fMLP诱导的与中性粒细胞激活相关的cGMP和NO增加非常小。相比之下，如NO释放化合物所观察到的，NO和cGMP的大幅增加会抑制趋化性。
请注意，翻译中保留了所有的专业术语和特定单位，如“NO”（一氧化氮）、“cGMP”（环鸟苷酸）、“fMLP”（N-甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸）、“SAG”（超氧阴离子生成）、“NOS”（NO合酶）、“L-NMMA”、“羧基-PTIO”、“LY 83583”、“KT 5823”、“Rp-8-pCPT-cGMPS”、“DPG”（二磷酸甘油酸）、“GEA 3162”、“GEA 5024”、“SIN-1”以及“IC50”（半数抑制浓度）、“EC50”（半数有效浓度）、“pmol/10⁶细胞”、“nmol O₂⁻/10⁶细胞/10分钟”、“ microM”（微摩尔）、“nM”（纳摩尔）等，以确保医学专业文献翻译的准确性和专业性。同时，对一些表述进行了适当的中文语法调整和优化，使译文更符合中文表达习惯。
