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让基因变绿:用平端PCR产物创建绿色荧光蛋白(GFP)融合体。

Making genes green: creating green fluorescent protein (GFP) fusions with blunt-end PCR products.

作者信息

Lo W, Rodgers W, Hughes T

机构信息

Department of Ophthalmology & Visual Science, Yale University School of Medicine, New Haven, CT 06520, USA.

出版信息

Biotechniques. 1998 Jul;25(1):94-6, 98. doi: 10.2144/98251st05.

Abstract

The jellyfish green fluorescent protein (GFP) has proven to be a useful tool in protein localization and trafficking studies. Fused to GFP, a protein of interest can be visualized and tracked in vivo through fluorescence microscopy. However, the process of making these fusion proteins is often tedious and painstaking. Here, we describe a simple and quick method for creating GFP fusion proteins using blunt-end PCR product ligation.

摘要

水母绿色荧光蛋白(GFP)已被证明是蛋白质定位和运输研究中的一种有用工具。与GFP融合后,目标蛋白可以通过荧光显微镜在体内进行可视化和追踪。然而,制备这些融合蛋白的过程通常繁琐且费力。在此,我们描述一种使用平端PCR产物连接来创建GFP融合蛋白的简单快速方法。

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