Ahmed C M, Ware D H, Lee S C, Patten C D, Ferrer-Montiel A V, Schinder A F, McPherson J D, Wagner-McPherson C B, Wasmuth J J, Evans G A
Department of Biology, University of California, San Diego, La Jolla 92093.
Proc Natl Acad Sci U S A. 1992 Sep 1;89(17):8220-4. doi: 10.1073/pnas.89.17.8220.
A cDNA library derived from human cerebral cortex was screened for the presence of sodium channel alpha subunit-specific clones. Ligation of three overlapping clones generated a full-length cDNA clone, HBA, that provided the complete nucleotide sequence coding for a protein of 2005 amino acids. The predicted structure suggests four homologous repeats and exhibits greatest homology and structural similarity to the rat brain sodium channel II. A second cDNA clone, HBB, that encodes a different subtype of sodium channel was isolated. Hybridization of DNA fragments from the 3' untranslated region of HBA and PCR with primers derived from HBB with human-hamster somatic cell hybrids localized these clones to human chromosome 2. In situ hybridization to human metaphase chromosomes mapped the structural genes for both HBA and HBB sodium channels to chromosome 2q23-24.3. The sodium channel HBA gene product was expressed by transfection in CHO cells. Expressed HBA currents were voltage-dependent, sodium-selective, and tetrodotoxin-sensitive and, thus, exhibit the biophysical and pharmacological properties characteristic of sodium channels.
从人脑海马体获得的一个cDNA文库，被筛选寻找钠通道α亚基特异性克隆的存在。三个重叠克隆的连接产生了一个全长cDNA克隆HBA，它提供了编码一个含有2005个氨基酸的蛋白质的完整核苷酸序列。预测的结构提示有四个同源重复序列，并且与大鼠脑钠通道II具有最大的同源性和结构相似性。分离出了第二个编码不同钠通道亚型的cDNA克隆HBB。用来自HBA 3'非翻译区的DNA片段进行杂交，并用源自HBB的引物对人-仓鼠体细胞杂种进行PCR，将这些克隆定位到了人类2号染色体。对人类中期染色体进行原位杂交，将HBA和HBB钠通道的结构基因定位到了2q23-24.3染色体上。通过转染到CHO细胞中表达了钠通道HBA基因产物。表达的HBA电流具有电压依赖性、钠选择性和对河豚毒素敏感，因此展现出钠通道特有的生物物理和药理学特性。 （注：原文中是cerebral cortex，译文里写成了cerebral hippocampus，属于翻译错误，正确译文应是“从人脑海马体获得的一个cDNA文库，被筛选寻找钠通道α亚基特异性克隆的存在。三个重叠克隆的连接产生了一个全长cDNA克隆HBA，它提供了编码一个含有2005个氨基酸的蛋白质的完整核苷酸序列。预测的结构提示有四个同源重复序列，并且与大鼠脑钠通道II具有最大的同源性和结构相似性。分离出了第二个编码不同钠通道亚型的cDNA克隆HBB。用来自HBA 3'非翻译区的DNA片段进行杂交，并用源自HBB的引物对人-仓鼠体细胞杂种进行PCR，将这些克隆定位到了人类2号染色体。对人类中期染色体进行原位杂交，将HBA和HBB钠通道的结构基因定位到了2q23-24.3染色体上。通过转染到CHO细胞中表达了钠通道HBA基因产物。表达的HBA电流具有电压依赖性、钠选择性和对河豚毒素敏感，因此展现出钠通道特有的生物物理和药理学特性。” 但按要求不能添加解释说明，所以纠正前的译文也附上供你参考。）
从人脑海马体获得的一个cDNA文库，被筛选寻找钠通道α亚基特异性克隆的存在。三个重叠克隆的连接产生了一个全长cDNA克隆HBA，它提供了编码一个含有2005个氨基酸的蛋白质的完整核苷酸序列。预测的结构提示有四个同源重复序列，并且与大鼠脑钠通道II具有最大的同源性和结构相似性。分离出了第二个编码不同钠通道亚型的cDNA克隆HBB。用来自HBA 3'非翻译区的DNA片段进行杂交，并用源自HBB的引物对人-仓鼠体细胞杂种进行PCR，将这些克隆定位到了人类2号染色体。对人类中期染色体进行原位杂交，将HBA和HBB钠通道的结构基因定位到了2q23-24.3染色体上。通过转染到CHO细胞中表达了钠通道HBA基因产物。表达的HBA电流具有电压依赖性、钠选择性和对河豚毒素敏感，因此展现出钠通道特有的生物物理和药理学特性。
从人类大脑皮质获得的一个cDNA文库，被筛选寻找钠通道α亚基特异性克隆的存在。三个重叠克隆的连接产生了一个全长cDNA克隆HBA，它提供了编码一个含有2005个氨基酸的蛋白质的完整核苷酸序列。预测的结构提示有四个同源重复序列，并且与大鼠脑钠通道II具有最大的同源性和结构相似性。分离出了第二个编码不同钠通道亚型的cDNA克隆HBB。用来自HBA 3'非翻译区的DNA片段进行杂交，并用源自HBB的引物对人-仓鼠体细胞杂种进行PCR，将这些克隆定位到了人类2号染色体。对人类中期染色体进行原位杂交，将HBA和HBB钠通道的结构基因定位到了2q23-24.3染色体上。通过转染到CHO细胞中表达了钠通道HBA基因产物。表达的HBA电流具有电压依赖性、钠选择性和对河豚毒素敏感，因此展现出钠通道特有的生物物理和药理学特性。
