Institute of Biochemistry and Molecular Biology, Shandong University School of Medicine, Wenhua Xi Road, Jinan, 250012 China.
Clin Exp Pharmacol Physiol. 2010 May;37(5-6):525-9. doi: 10.1111/j.1440-1681.2009.05348.x.
UbcH10 是一种与癌症相关的 E2 泛素缀合酶,其在多种恶性肿瘤中过表达。本研究旨在通过 RNA 干扰(RNAi)沉默 UbcH10 基因,并观察其对体外和体内结直肠癌细胞生长的抑制作用。
我们构建了表达载体 pGPU6/GFP/Neo/UbcH10-RNAi(pUbcH10-RNAi),其中包含 UbcH10 短发夹 RNA 表达盒。然后建立了 UbcH10 基因沉默细胞系 LoVo/UbcH10-RNAi 和 HT-29/UbcH10-RNAi。逆转录-聚合酶链反应和 Western blot 分析用于评估 UbcH10 基因的表达。细胞计数试剂盒-8 用于评估体外肿瘤细胞生长特性。流式细胞术用于检测 pUbcH10-RNAi 对结直肠癌细胞周期的影响。此外,在裸鼠异种移植模型中评估了 pUbcH10-RNAi 的抗肿瘤作用。
结果表明,pUbcH10-RNAi 处理的细胞中 UbcH10 基因表达明显降低。与对照条件相比,pUbcH10-RNAi 组结直肠癌细胞生长明显受到抑制,细胞停滞在 G2-M 期。在体内,pUbcH10-RNAi 下调 UbcH10 基因表达也抑制了裸鼠异种移植模型中的肿瘤生长。
我们的研究表明,RNAi 介导的 UbcH10 基因沉默对结直肠癌细胞具有抗肿瘤活性,可能为结直肠癌的治疗提供潜在的治疗方法。