Anumonwo J M, Delmar M, Jalife J
Department of Pharmacology, SUNY/Health Science Center, Syracuse 13210.
J Physiol. 1990 Jun;425:145-67. doi: 10.1113/jphysiol.1990.sp018097.
采用膜片钳技术(全细胞模式)研究了从兔三尖瓣分离的单个心肌细胞的电生理学特性。通过胶原酶处理并运用Langendorff逆行灌注法实现细胞分散。
分离后,细胞在恢复(Kraftbrühe)溶液中孵育时,具有清晰的横纹,大多呈纺锤形或棒状(少于10%),长度从35微米到超过150微米不等,直径为3至10微米。
暴露于Tyrode溶液后,耐钙细胞大多呈圆形,表面光滑,边界清晰。这些细胞的平均直径为15±5微米(标准差,n = 9)。较小比例(约30%)的细胞保留了原来的细长形状。
膜片钳记录显示,约30%的圆形细胞存在自发活动,细长形细胞中较少见。圆形细胞的最大舒张电位(MDPs)平均为-82±6 mV,起始电位为-56±3 mV(n = 9),平均最大除极速度(Vmax)值为6.3±0.6 V/s(n = 4)。在静息细胞中,平均静息电位为69±12 mV(n = 43)。
电压钳斜坡显示出具有负斜率区域的稳态I-V关系。细长形细胞的平均输入电阻值为25±9 MΩ(n = 16),圆形细胞为883±481 MΩ(n = 8)。
超极化5秒脉冲(钳制电位=-50 mV)偶尔会显示出一种缓慢的、时间依赖性内向电流,其峰值随钳制电位的增加而逐渐增大。这种缓慢激活的电流对2 mM铯敏感,表明其与所谓的“起搏电流”(iF)相似。在交替的电压钳和电流钳实验中,阻断iF并没有停止起搏活动,但起搏周期长度增加了四倍。
在一些细胞中,从-40或-50 mV的钳制电位进行5秒超极化步骤会产生大的、内向且电压依赖性的电流激增,随时间迅速衰减,类似于内向整流电流iK1的失活。该电流在电压比-100 mV更负时非常显著,其衰减过程最适合用两个时间常数来拟合,一个快一个慢。例如,在-150 mV时,时间常数分别为61和634毫秒。内向电流被1 mM钡阻断。(摘要截断于400字)