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利用嵌入磁纳米颗粒的二氧化硅纳米管快速简便分离大肠杆菌 O157:H7,用于基于核酸的检测。

The simple and fast isolation of Escherichia coli O157:H7 using magnet nanoparticle embedded silica nanotube for the nucleic acid based detection.

机构信息

Department of Chemical and Biomolecular Engineering, Sogang University, #1 Shinsu-dong, Mapo-gu, Seoul 121-742, Republic of Korea.

出版信息

J Biomed Nanotechnol. 2013 May;9(5):886-90. doi: 10.1166/jbn.2013.1499.

Abstract

In this study, we developed a simple and fast isolation tool of Escherichia coli O157:H7 (E. coli O157:H7) using a magnet nanoparticle embedded silica nanotube (MNSNT) for the detection of E. coli O157:H7 in the sample with nucleic acid based amplification. This method does not require chaotropic salt and sophisticated equipment to isolate bacteria. The E. coli O157:H7 in the sample was effectively bound to the hydrophilic surface of MNSNT in low pH binding buffer containing divalent ions and PEG without the need for expensive biological reagents such as antibodies. This E. coli O157:H7 bound MNSNT was simply isolated by a magnet, prior to adding an amplification mixture to the same micro tube without transferring the sample to another tube. Using this novel method, the detection sensitivities of E. coli O157:H7 (102 cfu/1 g of seed sprout and 102 cfu/5 mL of water) were 80% and 100%, respectively, whereas that was 0% using the commercial method.

摘要

在这项研究中,我们开发了一种简单快速的大肠杆菌 O157:H7(E. coli O157:H7)分离工具,使用嵌入磁纳米颗粒的二氧化硅纳米管(MNSNT),通过核酸扩增检测样品中的 E. coli O157:H7。这种方法不需要离液盐和复杂的设备来分离细菌。在含有二价离子和 PEG 的低 pH 结合缓冲液中,样品中的大肠杆菌 O157:H7 可有效结合到 MNSNT 的亲水表面,而无需使用昂贵的生物试剂(如抗体)。将结合了 MNSNT 的大肠杆菌 O157:H7 用磁铁简单分离后,无需将样品转移到另一个管中,即可直接向同一个微管中加入扩增混合物。使用这种新方法,大肠杆菌 O157:H7 的检测灵敏度(1 克豆芽中的 102 cfu 和 5 毫升水中的 102 cfu)分别为 80%和 100%,而使用商业方法的灵敏度则为 0%。

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