School of Biotechnology and Graduate School of Biochemistry at Yeungnam University, Gyeongsan 712-749, Korea
BMB Rep. 2013 Sep;46(9):471-6. doi: 10.5483/bmbrep.2013.46.9.021.
The PIDDosome, which is an oligomeric signaling complex composed of PIDD, RAIDD and caspase-2, can induce proximity-based dimerization and activation of caspase-2. In the PIDDosome assembly, the adaptor protein RAIDD interacts with PIDD and caspase-2 via CARD:CARD and DD:DD, respectively. To analyze the PIDDosome assembly, we purified all of the DD superfamily members and performed biochemical analyses. The results revealed that caspase-2 CARD is an insoluble protein that can be solubilized by its binding partner, RAIDD CARD, but not by full-length RAIDD; this indicates that full-length RAIDD in closed states cannot interact with caspase-2 CARD. Moreover, we found that caspase-2 CARD can be solubilized and interact with full-length RAIDD in the presence of PIDD DD, indicating that PIDD DD initially binds to RAIDD, after which caspase-2 can be recruited to RAIDD via a CARD:CARD interaction. Our study will be useful in determining the order of assembly of the PIDDosome.
PIDDosome 是一种由 PIDD、RAIDD 和 caspase-2 组成的寡聚信号复合物，能够诱导 caspase-2 的基于邻近的二聚化和激活。在 PIDDosome 组装过程中，衔接蛋白 RAIDD 通过 CARD:CARD 和 DD:DD 分别与 PIDD 和 caspase-2 相互作用。为了分析 PIDDosome 的组装，我们纯化了所有的 DD 超家族成员，并进行了生化分析。结果表明，caspase-2 的 CARD 是一种不可溶的蛋白质，它可以与结合伴侣 RAIDD 的 CARD 结合而溶解，但不能与全长 RAIDD 结合；这表明处于闭合状态的全长 RAIDD 不能与 caspase-2 的 CARD 相互作用。此外，我们发现 caspase-2 的 CARD 在 PIDD 的 DD 存在的情况下可以溶解并与全长 RAIDD 相互作用，表明 PIDD 的 DD 首先与 RAIDD 结合，然后 caspase-2 可以通过 CARD:CARD 相互作用被招募到 RAIDD 上。我们的研究将有助于确定 PIDDosome 的组装顺序。
