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一种使用卡那霉素抗性转座子Tn903的氨基糖苷3'-磷酸转移酶基因的基因融合系统:在乳酸克鲁维酵母和酿酒酵母中的应用。

A gene fusion system using the aminoglycoside 3'-phosphotransferase gene of the kanamycin-resistance transposon Tn903: use in the yeast Kluyveromyces lactis and Saccharomyces cerevisiae.

作者信息

Chen X J, Fukuhara H

机构信息

Institut Curie, Centre Universitaire, Orsay, France.

出版信息

Gene. 1988 Sep 30;69(2):181-92. doi: 10.1016/0378-1119(88)90429-5.

Abstract

The aminoglycoside 3'-phosphotransferase type I (APHI)-coding gene of the bacterial transposon Tn903 confers resistance to kanamycin on bacteria and resistance to geneticin (G418) on many eukaryotes. We developed an APHI fusion system that can be used in the study of gene expression in these organisms, particularly in yeasts. The first 19 codons of the KmR (APHI) gene can be deleted, and replaced by other genes in a continuous reading frame, without loss of APH activity. Examples of vector constructions are given which are adapted to the yeast Kluyveromyces lactis transformation system. Their derivatives containing the 2 mu origin of replication can also be used in Saccharomyces cerevisiae.

摘要

细菌转座子Tn903的I型氨基糖苷3'-磷酸转移酶(APHI)编码基因赋予细菌对卡那霉素的抗性,并赋予许多真核生物对遗传霉素(G418)的抗性。我们开发了一种APHI融合系统,可用于研究这些生物体中的基因表达,特别是在酵母中。KmR(APHI)基因的前19个密码子可以删除,并在连续阅读框中被其他基因取代,而不会丧失APH活性。给出了适用于乳酸克鲁维酵母转化系统的载体构建实例。它们含有2μm复制起点的衍生物也可用于酿酒酵母。

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