Pinilla Gladys, Campos Lesly, Durán Andrea, Navarrete Jeannette, Muñoz Liliana
Grupo de Investigación REMA, Facultad de Ciencias de la Salud, Programa de Bacteriología y Laboratorio Clínico, Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, Bogotá, D.C., Colombia.
Biomedica. 2018 Mar 15;38(1):128-35. doi: 10.7705/biomedica.v38i0.3740.
Introducción. La sífilis es una enfermedad producida por Treponema pallidum subespecie pallidum cuya incidencia mundial es de 12 millones de casos por año, aproximadamente; de estos, más de dos millones se presentan en mujeres gestantes, siendo la sífilis congénita la complicación más grave de esta infección en el embarazo.Objetivo. Detectar la presencia de T. pallidum subespecie pallidum en muestras clínicas para el diagnóstico de sífilis congénita mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR) anidada y determinar su concordancia con las pruebas serológicas.Materiales y métodos. Mediante PCR convencional y anidada, se amplificaron tres genes diana (polA, 16S ADNr y TpN47) y se confirmaron los productos de amplificación de los genes TpN47 y polA por secuenciación. Las pruebas serológicas empleadas fueron la VDRL (Venereal Disease Research Laboratory), la de reagina plasmática rápida (Rapid Plasma Reagin, RPR) y la de aglutinación de partículas para Treponema pallidum (Treponema pallidum Particle Agglutination Assay, TPPA).Resultados. La sensibilidad para la PCR convencional fue de 52 pg y, para la PCR anidada, de 0,52 pg. La especificidad con los iniciadores TpN47 y polA fue de 100 %; los resultados de la secuenciación mostraron una identidad de 97 % con T. pallidum. En 70 % de las muestras, los resultados de las pruebas serológicas y la PCR anidada concordaron.Conclusión. El gen TpN47 resultó ser el mejor blanco molecular para la identificación de T. pallidum. La PCR anidada se presenta como una alternativa de diagnóstico molecular promisoria para el diagnóstico de sífilis congénita.
引言。梅毒是由梅毒螺旋体苍白亚种引起的一种疾病，全球年发病率约为1200万例；其中，超过200万例发生在孕妇身上，先天性梅毒是妊娠期间这种感染最严重的并发症。
目的。通过巢式聚合酶链反应（PCR）检测临床样本中梅毒螺旋体苍白亚种，以诊断先天性梅毒，并确定其与血清学检测结果的一致性。
材料和方法。采用常规PCR和巢式PCR扩增三个靶基因（polA、16S rDNA和TpN47），并通过测序确认TpN47和polA基因的扩增产物。使用的血清学检测方法包括性病研究实验室玻片试验（VDRL）、快速血浆反应素试验（RPR）和梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）。
结果。常规PCR的灵敏度为52 pg，巢式PCR的灵敏度为0.52 pg。使用TpN47和polA引物的特异性为100%；测序结果显示与梅毒螺旋体的同一性为97%。在70%的样本中，血清学检测结果与巢式PCR结果一致。
结论。TpN47基因是鉴定梅毒螺旋体的最佳分子靶点。巢式PCR是一种有前景的分子诊断方法，可用于先天性梅毒的诊断。
