Suppr超能文献

TZM-gfp 细胞:一种用于分析罕见和早期 HIV-1 感染的易处理荧光工具。

TZM-gfp cells: a tractable fluorescent tool for analysis of rare and early HIV-1 infection.

机构信息

Department of Microbiology and Immunology, College of Veterinary Medicine, Cornell University, Ithaca, NY, 14853, USA.

Malawi-Liverpool-Wellcome Trust Clinical Research Programme, University of Malawi College of Medicine, Blantyre, Malawi.

出版信息

Sci Rep. 2020 Nov 16;10(1):19900. doi: 10.1038/s41598-020-76422-6.

Abstract

Here we describe TZM-gfp, a novel HIV-1 reporter cell derived from the same parental clone JC.53, used previously to generate the widely-utilized indicator cell line TZM-bl. We re-engineered JC.53 cells to express GFP under regulation of HIV Tat and Rev. We characterize the new reporter cell line to show that TZM-gfp cells are equally susceptible to HIV infection, exhibit minimal background signal, and can report HIV infection in rare cells from a bulk population of experimentally-infected human monocyte-derived macrophages. We demonstrate the utility and sensitivity of the cells in detection of even a single HIV-positive macrophage by fluorescence-assisted correlative electron microscopy, using the GFP signal to guide imaging of HIV virions in primary co-culture. Finally, we used TZM-gfp cells for viral capture during co-culture with human peripheral blood mononuclear cells, showing that TZM-gfp can support outgrowth and analyses of patient-derived primary HIV-1 isolates.

摘要

在这里,我们描述了 TZM-gfp,这是一种源自先前用于生成广泛使用的指示细胞系 TZM-bl 的相同亲本克隆 JC.53 的新型 HIV-1 报告细胞。我们对 JC.53 细胞进行了重新设计,使其在 HIV Tat 和 Rev 的调控下表达 GFP。我们对新的报告细胞系进行了表征,结果表明 TZM-gfp 细胞同样容易感染 HIV,背景信号最小,并且可以报告来自大量实验感染的人单核细胞来源的巨噬细胞群体中的稀有细胞中的 HIV 感染。我们通过荧光辅助相关电子显微镜证明了这些细胞在检测单个 HIV 阳性巨噬细胞时的实用性和灵敏度,使用 GFP 信号来指导在原代共培养物中 HIV 病毒粒子的成像。最后,我们在与人类外周血单核细胞的共培养中使用 TZM-gfp 细胞进行病毒捕获,表明 TZM-gfp 可以支持患者来源的原发性 HIV-1 分离物的生长和分析。

https://cdn.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/blobs/246a/7670428/a9425202233c/41598_2020_76422_Fig1_HTML.jpg

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