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用于仓鼠卵巢悬浮细胞系的微流控单细胞培养和活细胞成像的方案。

Protocol for microfluidic single-cell cultivation and live-cell imaging of Chinese hamster ovary suspension cell lines.

机构信息

Multiscale Bioengineering, Faculty of Technology, Bielefeld University, Universitätsstraße 25, 33615 Bielefeld, Germany.

Institute of Process Engineering in Life Sciences, Microsystems in Bioprocess Engineering, Karlsruhe Institute of Technology (KIT), Fritz-Haber-Weg 2, 76131 Karlsruhe, Germany.

出版信息

STAR Protoc. 2024 Jun 21;5(2):103106. doi: 10.1016/j.xpro.2024.103106. Epub 2024 Jun 1.

DOI:10.1016/j.xpro.2024.103106
PMID:38824641
原文链接:https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC11176845/
Abstract

Microfluidic single-cell cultivation (MSCC) is a powerful tool for investigating the cellular behavior of various cell types at the single-cell level. Here, we present a protocol specifically developed for the reliable and reproducible MSCC of industrially relevant Chinese hamster ovary (CHO) suspension cell lines. We summarize critical experimental steps from the initial seed train up to the final MSCC experiment, with a special focus on pre-culture management and medium preparation, device inoculation, and the establishment of a constant medium perfusion.

摘要

微流控单细胞培养（MSCC）是一种强大的工具，可用于在单细胞水平上研究各种细胞类型的细胞行为。在这里，我们提出了一种专门针对可靠和可重复的工业相关中国仓鼠卵巢（CHO）悬浮细胞系的 MSCC 的方案。我们总结了从初始种子培养到最终 MSCC 实验的关键实验步骤，特别关注预培养管理和培养基制备、设备接种以及恒定培养基灌注的建立。

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