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使用双标记嵌合体分析定量重建小鼠细胞谱系的方案。

Protocol for quantitative reconstruction of cell lineage using mosaic analysis with double markers in mice.

机构信息

Institute of Science and Technology Austria (ISTA), Am Campus 1, 3400 Klosterneuburg, Austria.

Institute of Science and Technology Austria (ISTA), Am Campus 1, 3400 Klosterneuburg, Austria.

出版信息

STAR Protoc. 2024 Sep 20;5(3):103157. doi: 10.1016/j.xpro.2024.103157. Epub 2024 Jun 26.

Abstract

The generation of diverse cell types during development is fundamental to brain functions. We outline a protocol to quantitatively assess the clonal output of individual neural progenitors using mosaic analysis with double markers (MADM) in mice. We first describe steps to acquire and reconstruct adult MADM clones in the superior colliculus. Then we detail analysis pipelines to determine clonal composition and architecture. This protocol enables the buildup of quantitative frameworks of lineage progression with precise spatial resolution in the brain. For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to Cheung et al..

摘要

在发育过程中产生不同的细胞类型是大脑功能的基础。我们概述了一种使用小鼠中的双标记马赛克分析(MADM)定量评估单个神经祖细胞克隆输出的方案。我们首先描述了在顶盖中获取和重建成年 MADM 克隆的步骤。然后,我们详细介绍了分析管道,以确定克隆组成和结构。该方案可在大脑中以精确的空间分辨率建立谱系进展的定量框架。有关此方案的使用和执行的完整详细信息,请参阅 Cheung 等人的研究。

https://cdn.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/blobs/9dd7/11260041/dee346d63e02/fx1.jpg

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