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使用蛋白脂质缀合物评估 S-酰化蛋白膜亲和力的方案。

Protocol for evaluating S-acylated protein membrane affinity using protein-lipid conjugates.

机构信息

School of Life Sciences, Chongqing University, Chongqing 401331, China.

School of Pharmaceutical Sciences, Chongqing University, Chongqing 401331, China.

出版信息

STAR Protoc. 2024 Sep 20;5(3):103182. doi: 10.1016/j.xpro.2024.103182. Epub 2024 Aug 1.

DOI:10.1016/j.xpro.2024.103182
PMID:39093703
原文链接:https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC11342258/
Abstract

S-acylation of proteins allows their association with membranes. Here, we present a protocol for establishing a platform for membrane affinity evaluation of S-acylated proteins in vitro. We describe steps for preparing lipid-maleimide compounds, mCherry-p62 recombinant proteins, and total cellular membranes. We then detail procedures for synthesizing protein-lipid conjugates using lipid-maleimide compounds and recombinant proteins and evaluating the membrane affinity of protein-lipid conjugates. For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to Huang Xue et al..

摘要

蛋白质的 S-酰化作用可使其与膜结合。在这里，我们提出了一种在体外评估 S-酰化蛋白与膜亲和力的平台建立方案。我们描述了制备脂质马来酰亚胺化合物、mCherry-p62 重组蛋白和总细胞膜的步骤。然后，我们详细介绍了使用脂质马来酰亚胺化合物和重组蛋白合成蛋白-脂质缀合物并评估蛋白-脂质缀合物与膜亲和力的步骤。有关此方案使用和执行的完整详细信息，请参阅 Huang Xue 等人的研究。

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