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链霉蛋白酶在蛋白质复合DNA电子显微镜观察中的应用。

The use of pronase for electron microscopy of protein-complexed DNA.

作者信息

Tsaneva I, Tsanev R

出版信息

Mol Biol Rep. 1979 Aug 31;5(3):155-60. doi: 10.1007/BF00778415.

Abstract

A method is described which demonstrates the posibility of visualizing protein-complexed DNA by using pronase for both deproteinization and spreading of DNA for electron microscopy. The results show that proteolytic digestion is complete even under conditions of short formaldehyde fixation and pronase is an excellent substitute for cytochrome c for spreading of DNA. The pronase method is successfully applied to virions, native and partially denatured chromatin. The procedure is highly advantageous because it does not require preliminary isolation of DNA, can be applied to microamounts of material and permits the visualization of partial denaturation of DNA in chromatin.

摘要

本文描述了一种方法,该方法通过使用链霉蛋白酶进行DNA的脱蛋白和铺展,以用于电子显微镜观察蛋白质复合DNA的可能性。结果表明,即使在短时间甲醛固定的条件下,蛋白水解消化也是完全的,并且链霉蛋白酶是用于DNA铺展的细胞色素c的极佳替代品。链霉蛋白酶法已成功应用于病毒粒子、天然和部分变性的染色质。该方法具有高度优势,因为它不需要预先分离DNA,可应用于微量材料,并能观察到染色质中DNA的部分变性。

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