Ou C N, Rognerud C L
Department of Pathology, Texas Children's Hospital, Houston 77030.
Clin Chem. 1993 May;39(5):820-4.
We investigated the use of a 3.5 x 0.46 cm HPLC column packed with 5-microns particles of porous (100 nm) silica coated with polyaspartic acid for hemoglobin analysis. A 13-min gradient was produced between two mobile phases. The method is capable of separating more than 35 commonly encountered hemoglobin variants within 12 min. Hemoglobin variants identified include Bart's, acetyl F, H, A1c, F, Camden, N-Baltimore, J-Baltimore, N-Seattle, Grady, Fannin-Lubbock, A G-Georgia, Lepore-Baltimore, P-Galveston, G-Coushatta, Lepore-Boston, E, Osu Christiansborg, A2, G-Philadelphia, Korle Bu, Russ, Richmond, D-Los Angeles, Deer Lodge, Montgomery, S, Q-Thailand, G-San Jose, A2', Hasharon, Q-India, Tampa, GS hybrid, C-Harlem, O-Arab, British Columbia, and C. Between-run precision of an in-house pooled hemoglobin control material, AFSCA2, gave CVs of 2-5% for the A, F, S, and C and 8% for the A2 over a 6-month period. The simplicity of sample preparation, high resolution of the system, and high accuracy of the method, combined with complete automation, make this an ideal methodology for the routine diagnosis of hemoglobin disorders in a clinical laboratory.
我们研究了使用一根3.5×0.46厘米的高效液相色谱（HPLC）柱进行血红蛋白分析，该柱填充有涂覆聚天冬氨酸的5微米多孔（100纳米）硅胶颗粒。在两种流动相之间产生了一个13分钟的梯度。该方法能够在12分钟内分离出35种以上常见的血红蛋白变体。鉴定出的血红蛋白变体包括巴特氏血红蛋白、乙酰F、H、A1c、F、卡姆登血红蛋白、N - 巴尔的摩血红蛋白、J - 巴尔的摩血红蛋白、N - 西雅图血红蛋白、格雷迪血红蛋白、范宁 - 卢伯克血红蛋白、A G - 佐治亚血红蛋白、勒波雷 - 巴尔的摩血红蛋白、P - 加尔维斯顿血红蛋白、G - 库沙塔血红蛋白、勒波雷 - 波士顿血红蛋白、E、奥苏克里斯蒂安斯堡血红蛋白、A2、G - 费城血红蛋白、科勒布血红蛋白、拉斯血红蛋白、里士满血红蛋白、D - 洛杉矶血红蛋白、迪尔洛奇血红蛋白、蒙哥马利血红蛋白、S、Q - 泰国血红蛋白、G - 圣何塞血红蛋白、A2'、哈沙龙血红蛋白、Q - 印度血红蛋白、坦帕血红蛋白、GS杂交血红蛋白、C - 哈莱姆血红蛋白、O - 阿拉伯血红蛋白、不列颠哥伦比亚血红蛋白和C。在6个月的时间里，内部混合血红蛋白对照物质AFSCA2的批间精密度对于A、F、S和C的变异系数为2 - 5%，对于A2为8%。样品制备的简单性、系统的高分辨率、方法的高精度以及完全自动化相结合，使其成为临床实验室中血红蛋白疾病常规诊断的理想方法。
