Pyzocha Neena K, Ran F Ann, Hsu Patrick D, Zhang Feng
Broad Institute of MIT and Harvard, Massachusetts Institute of Technology, Cambridge, USA.
Methods Mol Biol. 2014;1114:269-77. doi: 10.1007/978-1-62703-761-7_17.
The microbial CRISPR-Cas adaptive immune system can be harnessed to facilitate genome editing in eukaryotic cells (Cong L et al., Science 339, 819-823, 2013; Mali P et al., Science 339, 823-826, 2013). Here we describe a protocol for the use of the RNA-guided Cas9 nuclease from the Streptococcus pyogenes type II CRISPR system to achieve specific, scalable, and cost-efficient genome editing in mammalian cells.
微生物的CRISPR-Cas适应性免疫系统可用于促进真核细胞中的基因组编辑(Cong L等人,《科学》339卷,819 - 823页,2013年;Mali P等人,《科学》339卷,823 - 826页,2013年)。在此,我们描述了一种使用来自化脓性链球菌II型CRISPR系统的RNA引导的Cas9核酸酶在哺乳动物细胞中实现特异性、可扩展且经济高效的基因组编辑的方案。