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PDGFRA 对于小鼠胚外内胚层干细胞系的建立和维持并非必需。

PDGFRA Is Not Essential for the Derivation and Maintenance of Mouse Extraembryonic Endoderm Stem Cell Lines.

机构信息

Max Planck Research Unit for Neurogenetics, Max-von-Laue-Strasse 4, 60438 Frankfurt, Germany.

Max Planck Research Unit for Neurogenetics, Max-von-Laue-Strasse 4, 60438 Frankfurt, Germany.

出版信息

Stem Cell Reports. 2017 Oct 10;9(4):1062-1070. doi: 10.1016/j.stemcr.2017.08.005. Epub 2017 Sep 14.

Abstract

Extraembryonic endoderm stem (XEN) cell lines can be derived and maintained in vitro and reflect the primitive endoderm lineage. Platelet-derived growth factor receptor alpha (PDGFRA) is thought to be essential for the derivation and maintenance of mouse XEN cell lines. Here, we have re-evaluated this requirement for PDGFRA. We derived multiple PDGFRA-deficient XEN cell lines from postimplantation and preimplantation embryos of a PDGFRA-GFP knockout strain. We also converted PDGFRA-deficient embryonic stem cell lines into XEN cell lines chemically by transient culturing with retinoic acid and Activin A. We confirmed the XEN profile of our 12 PDGFRA-deficient cell lines by immunofluorescence with various markers, by NanoString gene expression analyses, and by their contribution to the extraembryonic endoderm of chimeric embryos produced by injecting these cells into blastocysts. Thus, PDGFRA is not essential for the derivation and maintenance of XEN cell lines.

摘要

胚外内胚层干细胞(XEN)系可在体外衍生和维持,并反映原始内胚层谱系。血小板衍生生长因子受体α(PDGFRA)被认为对于衍生和维持小鼠 XEN 细胞系是必不可少的。在这里,我们重新评估了 PDGFRA 的这一要求。我们从 PDGFRA-GFP 敲除系的植入后和植入前胚胎中衍生出多个 PDGFRA 缺陷型 XEN 细胞系。我们还通过用视黄酸和激活素 A 瞬时培养将 PDGFRA 缺陷型胚胎干细胞系转化为 XEN 细胞系。我们通过用各种标记物进行免疫荧光、通过 NanoString 基因表达分析以及通过将这些细胞注射到囊胚中产生的嵌合胚胎的胚外内胚层中的贡献来确认我们的 12 个 PDGFRA 缺陷型细胞系的 XEN 特征。因此,PDGFRA 对于 XEN 细胞系的衍生和维持不是必需的。

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