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通过流式细胞术细胞分选分离表达绿色荧光蛋白的疟原虫休眠子。

Isolation of GFP-expressing Malarial Hypnozoites by Flow Cytometry Cell Sorting.

作者信息

der Wel Annemarie Voorberg-van, Hofman Sam O, Kocken Clemens H M

机构信息

Department of Parasitology, Biomedical Primate Research Centre, 2288 GJ Rijswijk, The Netherlands.

出版信息

Bio Protoc. 2021 May 5;11(9):e4006. doi: 10.21769/BioProtoc.4006.

Abstract

Hypnozoites are dormant liver-stage parasites unique to relapsing malarial species, including the important human pathogen , and pose a barrier to the elimination of malaria. Little is known regarding the biology of these stages, largely due to their inaccessible location. Hypnozoites can be cultured but these cultures always consist of a mixture of hepatocytes, developing forms, and hypnozoites. Here, using a GFP-expressing line of the hypnozoite model parasite , we describe a protocol for the FACS-based isolation of malarial hypnozoites. The purified hypnozoites can be used for a range of '-omics' studies to dissect the biology of this cryptic stage of the malarial life cycle.

摘要

休眠子是复发型疟原虫所特有的处于肝脏阶段的休眠寄生虫,包括重要的人类病原体,并且是疟疾消除的一个障碍。关于这些阶段的生物学特性知之甚少,这主要是由于它们所处位置难以触及。休眠子可以进行培养,但这些培养物总是由肝细胞、发育形态和休眠子的混合物组成。在这里,我们使用表达绿色荧光蛋白的休眠子模型寄生虫株,描述了一种基于荧光激活细胞分选术(FACS)分离疟原虫休眠子的方案。纯化的休眠子可用于一系列“组学”研究,以剖析疟原虫生命周期中这个隐秘阶段的生物学特性。

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