Department of Medicine, University of California, San Diego, La Jolla, CA.
Institut de Pharmacologie et Biologie Structurale, Université de Toulouse, Centre National de la Recherche Scientifique, Université Paul Sabatier, Toulouse, France.
J Exp Med. 2022 Aug 1;219(8). doi: 10.1084/jem.20211637. Epub 2022 Jun 29.
Rap1 GTPase drives assembly of the Mig-10/RIAM/Lamellipodin (MRL protein)-integrin-talin (MIT) complex that enables integrin-dependent lymphocyte functions. Here we used tandem affinity tag-based proteomics to isolate and analyze the MIT complex and reveal that Phostensin (Ptsn), a regulatory subunit of protein phosphatase 1, is a component of the complex. Ptsn mediates dephosphorylation of Rap1, thereby preserving the activity and membrane localization of Rap1 to stabilize the MIT complex. CRISPR/Cas9-induced deletion of PPP1R18, which encodes Ptsn, markedly suppresses integrin activation in Jurkat human T cells. We generated apparently healthy Ppp1r18-/- mice that manifest lymphocytosis and reduced population of peripheral lymphoid tissues ascribable, in part, to defective activation of integrins αLβ2 and α4β7. Ppp1r18-/- T cells exhibit reduced capacity to induce colitis in a murine adoptive transfer model. Thus, Ptsn enables lymphocyte integrin-mediated functions by dephosphorylating Rap1 to stabilize the MIT complex. As a consequence, loss of Ptsn ameliorates T cell-mediated colitis.
Rap1 GTPase 驱动 Mig-10/RIAM/Lamellipodin（MRL 蛋白）-整合素-塔林（MIT）复合物的组装，使整合素依赖的淋巴细胞功能成为可能。在这里，我们使用串联亲和标签蛋白组学来分离和分析 MIT 复合物，并揭示磷酸丝氨酸（Ptsn）是一种蛋白磷酸酶 1 的调节亚基，是复合物的一个组成部分。Ptsn 介导 Rap1 的去磷酸化，从而保持 Rap1 的活性和膜定位，稳定 MIT 复合物。CRISPR/Cas9 诱导的 PPP1R18 缺失，其编码 Ptsn，显著抑制 Jurkat 人 T 细胞中整合素的激活。我们生成了显然健康的 Ppp1r18-/-小鼠，其表现出淋巴细胞增多和外周淋巴组织减少，部分归因于整合素 αLβ2 和 α4β7 的激活缺陷。Ppp1r18-/-T 细胞在小鼠过继转移模型中诱导结肠炎的能力降低。因此，Ptsn 通过去磷酸化 Rap1 来稳定 MIT 复合物，从而使淋巴细胞整合素介导的功能成为可能。因此，Ptsn 的缺失减轻了 T 细胞介导的结肠炎。
