腺相关病毒介导的大型动物模型中心脏和骨骼肌的体基因编辑。

AAV-Mediated Somatic Gene Editing for Cardiac and Skeletal Muscle in a Large Animal Model.

机构信息

Klinik und Poliklinik für Innere Medizin I, Klinikum rechts der Isar der Technical University Munich, Munich, Germany.

German Center for Cardiovascular Research (DZHK), Munich Heart Alliance, Munich, Germany.

出版信息

Methods Mol Biol. 2022;2573:63-74. doi: 10.1007/978-1-0716-2707-5_6.

DOI:10.1007/978-1-0716-2707-5_6

PMID:36040587

Abstract

Here we describe a protocol to produce a recombinant adeno-associated viral vector (rAAV)-based system to deliver the CRISPR-Cas9 complex into porcine skeletal muscle and myocardial cells. We initially describe the genomic composition of the rAAV-CRISPR vectors used in our lab. Furthermore, we give a step-by-step instruction into the production of recombinant viral vectors with high yields and purity. Lastly we describe the minimally invasive injection regimes to target the myocardium in a pig.

摘要

在这里，我们描述了一种使用重组腺相关病毒（rAAV）载体将 CRISPR-Cas9 复合物递送到猪骨骼肌和心肌细胞中的方案。我们首先描述了实验室中使用的 rAAV-CRISPR 载体的基因组组成。此外，我们提供了一个逐步的说明，用于生产高产量和高纯度的重组病毒载体。最后，我们描述了针对猪心肌的微创注射方案。