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生成上胚层干细胞三维培养物的方案。

Protocol for generating a 3D culture of epiblast stem cells.

作者信息

Rosa Viviane S, Sato Nanami, Shahbazi Marta N

机构信息

MRC Laboratory of Molecular Biology, Cambridge CB2 0QH, UK.

MRC Laboratory of Molecular Biology, Cambridge CB2 0QH, UK.

出版信息

STAR Protoc. 2024 Dec 20;5(4):103347. doi: 10.1016/j.xpro.2024.103347. Epub 2024 Sep 27.

DOI:10.1016/j.xpro.2024.103347
PMID:39340775
原文链接:https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC11465143/
Abstract

Mouse gastrulation entails concomitant changes in cell fate, tissue shape, and embryo size. The use of a reproducible in vitro system is crucial for dissecting the mechanisms that coordinate these events. Here, we present a protocol for generating a 3D culture of epiblast stem cells (3D EpiSCs), which grow as epithelial spheroids mimicking key features of the gastrulating mouse embryonic epiblast. We describe steps for spheroid formation, growth, and passaging, followed by imaging or further downstream analyses. For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to Sato et al..

摘要

小鼠原肠胚形成伴随着细胞命运、组织形态和胚胎大小的同步变化。使用可重复的体外系统对于剖析协调这些事件的机制至关重要。在这里，我们展示了一种生成上胚层干细胞三维培养物（3D EpiSCs）的方案，这些细胞生长为上皮球体，模拟原肠胚形成期小鼠胚胎上胚层的关键特征。我们描述了球体形成、生长和传代的步骤，随后进行成像或进一步的下游分析。有关此方案的使用和执行的完整详细信息，请参考佐藤等人的研究。

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