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生物发光共振能量转移 (BRET) 测定法检测胃饥饿素受体与 Gq 的募集

Bioluminescence Resonance Energy Transfer (BRET) Assay to Measure Gq Recruitment to the Ghrelin Receptor.

机构信息

Metabolism and Systems Science, University of Birmingham, Birmingham, UK.

Centre of Membrane Proteins and Receptors (COMPARE), Universities of Birmingham and Nottingham, Birmingham, UK.

出版信息

Methods Mol Biol. 2025;2861:57-69. doi: 10.1007/978-1-0716-4164-4_5.

DOI:10.1007/978-1-0716-4164-4_5
PMID:39395097
Abstract

This protocol chapter outlines a guide for investigating ghrelin receptor activation of Gq signaling using Bioluminescence Resonance Energy Transfer (BRET). Focusing on the eBRET and NanoBRET™ variants, the chapter covers steps from cell culture to transfection, ligand stimulation, and BRET measurements, offering a robust protocol to examine the temporal aspects of Gq signaling in live cells. This methodology facilitates a nuanced understanding of Gq-mediated cellular responses, but also provides researchers with a valuable tool for dissecting other related signaling pathways.

摘要

本方案章节概述了使用生物发光共振能量转移 (BRET) 研究生长激素释放肽受体激活 Gq 信号的指南。本章节重点介绍 eBRET 和 NanoBRET™ 变体,涵盖了从细胞培养到转染、配体刺激和 BRET 测量的步骤,提供了一个强大的方案来研究活细胞中 Gq 信号的时间方面。该方法不仅有助于深入了解 Gq 介导的细胞反应,还为研究人员提供了一种有价值的工具,用于剖析其他相关信号通路。

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