Ernst S A, van Rossum G D
J Physiol. 1982 Apr;325:333-52. doi: 10.1113/jphysiol.1982.sp014153.
利用取自经盐分适应的北京鸭的盐腺切片,研究了乙酰甲胆碱对禽类盐腺净离子转运和能量代谢的影响。在38℃进行实验孵育前,将切片在1℃下用培养基和药物平衡120分钟。
在38℃孵育期间,切片积累K⁺,并丢失Na⁺和Cl⁻。在乙酰甲胆碱存在的情况下,它们保留了更多的Na⁺和Cl⁻,积累的K⁺更少,0.5 - 1.0 mM的乙酰甲胆碱产生最大效应。无论培养基中含有10 mM - Tris(大多数实验中使用)还是25 mM - HCO₃⁻作为主要缓冲剂,都得到了类似的结果。
当同时存在呋塞米(1 mM)时,未观察到乙酰甲胆碱诱导的细胞Na⁺和Cl⁻的较高终末水平。当培养基中的Cl⁻被I⁻、NO₃⁻或SO₄²⁻取代时,乙酰甲胆碱未诱导细胞Na⁺水平升高,当培养基中的Na⁺被胆碱或Li⁺取代时,也未诱导Cl⁻含量升高。呋塞米或用其他阴离子取代培养基中的Cl⁻也可防止乙酰甲胆碱引起的K⁺积累下降。阴离子转运抑制剂SCN⁻(高达10 mM)和4,4'-二异硫氰酸 - 2,2'-二磺酸芪(DIDS)(高达2 mM)不能阻止乙酰甲胆碱的作用。
乙酰甲胆碱刺激呼吸并降低切片ATP含量,哇巴因或呋塞米均可阻止这些作用。哇巴因而非呋塞米还降低了基础(即无乙酰甲胆碱时)呼吸速率并提高了ATP水平。SCN⁻和DIDS对基础或刺激的呼吸或ATP含量无影响。
如果用胆碱取代培养基中的Na⁺,则可完全阻止乙酰甲胆碱诱导的呼吸刺激和ATP下降。用Li⁺取代Na⁺会引起基础呼吸的一些刺激;在乙酰甲胆碱存在的情况下,它也允许一些ATP的损失,但损失小于在正常Na⁺培养基中所见。
如果用SO₄²⁻取代培养基中的Cl⁻,则可阻止乙酰甲胆碱诱导的呼吸刺激和ATP下降。当NO₃⁻取代Cl⁻时,乙酰甲胆碱的作用被部分阻断。
结果与乙酰甲胆碱刺激呋塞米敏感的、Na⁺和Cl⁻耦联进入细胞的过程一致,这与K⁺的丢失相关。这将导致通过对哇巴因敏感的Na⁺和K⁺转运系统刺激Na⁺的排出,同时ATP消耗增加。