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利用10Sa RNA十肽在大肠杆菌中对截短的重组蛋白进行C末端延伸。

C-terminal extension of truncated recombinant proteins in Escherichia coli with a 10Sa RNA decapeptide.

作者信息

Tu G F, Reid G E, Zhang J G, Moritz R L, Simpson R J

机构信息

Joint Protein Structure Laboratory, Ludwig Institute for Cancer Research (Melbourne Branch), Parkville, Victoria, Australia.

出版信息

J Biol Chem. 1995 Apr 21;270(16):9322-6. doi: 10.1074/jbc.270.16.9322.

DOI:10.1074/jbc.270.16.9322
PMID:7536743
Abstract

When murine interleukin-6 is overexpressed in Escherichia coli, a small population of molecules exhibits a novel C-terminal modification. Peptide mapping, electrospray ionization-mass spectrometry, and automated N- and C-terminal sequencing identified a peptide ("tag" peptide), -Ala-Ala-Asn-Asp-Glu-Asn-Tyr-Ala-Leu-Ala-Ala-COOH, encoded by a small metabolically stable RNA of E. coli (10Sa RNA) attached to truncated C termini of the recombinant protein. A mutant strain of E. coli in which the chromosomal 10Sa RNA gene (ssrA) is disrupted does not produce this C-terminal modification, confirming that the tag peptide originates from the ssrA gene.

摘要

当小鼠白细胞介素-6在大肠杆菌中过表达时,一小部分分子会呈现出一种新的C末端修饰。肽图谱分析、电喷雾电离质谱分析以及自动N末端和C末端测序鉴定出一种肽(“标签”肽),-Ala-Ala-Asn-Asp-Glu-Asn-Tyr-Ala-Leu-Ala-Ala-COOH,它由大肠杆菌的一种小的代谢稳定RNA(10Sa RNA)编码,并附着于重组蛋白的截短C末端。一种染色体10Sa RNA基因(ssrA)被破坏的大肠杆菌突变株不会产生这种C末端修饰,这证实了标签肽源自ssrA基因。

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