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禾本科柄锈菌小麦专化型丝状真菌EF-1α基因的分离与鉴定

Isolation and characterization of the EF-1 alpha gene of the filamentous fungus Puccinia graminis f. sp. tritici.

作者信息

Schillberg S, Gross P, Tiburzy R

机构信息

Institut für Biologie III (Pflanzenphysiologie, Rheinisch-Westfälische Tecnische Hochschule Aachen, Germany.

出版信息

Curr Genet. 1995 Mar;27(4):367-72. doi: 10.1007/BF00352106.

Abstract

A gene of Puccinia graminis f. sp. tritici, coding for the translation elongation factor 1 alpha (EF-1 alpha), was isolated from a P. graminis genomic library using the EF-1 alpha gene sequence of Absidia glauca. The coding region of 1389 nucleotides encodes a polypeptide of 463 amino acids and is interrupted by eight introns. An additional intron is located in the 5' untranslated region. A single transcription start point (tsp) was mapped by primer extension. A cDNA fragment corresponding to P. graminis EF-1 alpha mRNA hybridized with a 1.9-kb-long poly(A+)RNA, sufficient to encode the EF-1 alpha protein. Southern hybridization of digested genomic DNA revealed that two copies of the EF-1 alpha gene exist in the genome of P. graminis.

摘要

利用灰绿犁头霉的翻译延伸因子1α(EF-1α)基因序列,从小麦秆锈菌基因组文库中分离出一个编码该因子的小麦秆锈菌基因。1389个核苷酸的编码区编码一个由463个氨基酸组成的多肽,该编码区被8个内含子打断。一个额外的内含子位于5'非翻译区。通过引物延伸确定了一个单一的转录起始点(tsp)。与小麦秆锈菌EF-1α mRNA对应的cDNA片段与一个1.9kb长的聚腺苷酸加尾RNA(poly(A+)RNA)杂交,该RNA足以编码EF-1α蛋白。对消化后的基因组DNA进行Southern杂交显示,小麦秆锈菌基因组中存在两个EF-1α基因拷贝。

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