Animal Virus Research Institute, Pirbright, Surrey.
Biochem J. 1966 Dec;101(3):721-6. doi: 10.1042/bj1010721.
用苯酚-EDTA 混合物从仓鼠肾细胞中提取 RNA,并用 Sephadex G-25 柱进一步纯化,该柱用平衡水预平衡。
在 4°C 下老化总 RNA 提取物或在 95°C 下加热后快速冷却会导致 28s RNA 转化为在蔗糖梯度中约 18s 处沉降的物质。
当加热的 RNA 用苯酚重新提取时,沉降图谱没有恢复到未加热 RNA 的图谱。
将 28s 和 18s RNA 部分分别从蔗糖梯度中沉淀出来,用 2 倍体积的乙醇沉淀,并通过用平衡水预平衡的 Sephadex G-25 柱。
在 95°C 下加热纯化的 28s RNA 会导致沉降系数增加到约 40s,而类似的 18s RNA 处理则不会导致明显增加。如果在 Sephadex G-25 处理之前加热 RNA,则 28s 和 18s RNA 的沉降系数降低至约 12s 和 8s。
在 95°C 下加热纯化的 28s 和 18s RNA 的混合物会导致一些 18s 物质与 28s 部分聚集。