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赖氨酸ε-氨基转移酶基因的克隆与定位,该酶是链霉菌属中启动β-内酰胺生物合成的一种酶

Cloning and location of a gene governing lysine epsilon-aminotransferase, an enzyme initiating beta-lactam biosynthesis in Streptomyces spp.

作者信息

Madduri K, Stuttard C, Vining L C

机构信息

Department of Microbiology, Dalhousie University, Halifax, Nova Scotia, Canada.

出版信息

J Bacteriol. 1991 Feb;173(3):985-8. doi: 10.1128/jb.173.3.985-988.1991.

Abstract

In actinomycetes that produce beta-lactam antibiotics of the cephem type, lysine epsilon-aminotransferase is the initial enzyme in the conversion of lysine to alpha-aminoadipic acid. We used a two-stage process ("chromosome walking") to screen a lambda library of Streptomyces clavuligerus genomic DNA for fragments that expressed lysine epsilon-aminotransferase activity in S. lividans. Restriction analysis of the cloned DNA confirmed the location of the putative lat gene within the cluster of beta-lactam biosynthesis genes, roughly midway between pcbC, the structural gene for isopenicillin N synthetase, and the putative cefE gene encoding deacetoxycephalosporin C synthetase.

摘要

在产生头孢烯型β-内酰胺抗生素的放线菌中,赖氨酸ε-氨基转移酶是赖氨酸转化为α-氨基己二酸过程中的起始酶。我们采用两阶段过程(“染色体步移”)从克拉维链霉菌基因组DNA的λ文库中筛选出在淡紫链霉菌中表达赖氨酸ε-氨基转移酶活性的片段。对克隆DNA的限制性分析证实了假定的lat基因位于β-内酰胺生物合成基因簇内,大致在异青霉素N合成酶的结构基因pcbC和编码去乙酰氧头孢菌素C合成酶的假定cefE基因之间的中间位置。

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