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克列诺夫DNA聚合酶对异常X-DNA作为引物模板的识别与利用。

Recognition and use of the unusual X-DNA as a primer-template by Klenow DNA polymerase enzyme.

作者信息

Sági J, Vorlícková M, Kypr J, Otvös L

机构信息

Central Research Institute for Chemistry, Hungarian Academy of Sciences, Budapest.

出版信息

Biochem Biophys Res Commun. 1989 Jun 30;161(3):1204-12. doi: 10.1016/0006-291x(89)91370-3.

DOI:10.1016/0006-291x(89)91370-3
PMID:2662973
Abstract

Based on CD spectra, 2-amino-2'-deoxyadenosine-containing synthetic alternating DNA, poly(amino2dA-dt) undergoes a conformational transition from a B-form to a non-Z zig-zag form of DNA, called X, even under conditions where enzymes can work. Kinetic parameters of the E. coli Klenow DNA polymerase enzyme-catalyzed copying of both the B- and X-forms of poly(amino2dA-dT) have been determined. Binding affinity of X-DNA to the enzyme proved to be even higher than that of the B-DNA; primer-chain extension of X-poly(amino2dA-dT) was however hindered as compared to its B-form. This differential utilization of X-DNA versus B-DNA by a DNA polymerase is an in vitro enzymatic evidence of an unusual DNA conformation.

摘要

基于圆二色光谱,含2-氨基-2'-脱氧腺苷的合成交替DNA,聚(氨基2dA-dt)即使在酶能够发挥作用的条件下,也会经历从B型到一种称为X的非Z字形DNA构象的转变。已经测定了大肠杆菌Klenow DNA聚合酶催化复制聚(氨基2dA-dT)的B型和X型的动力学参数。事实证明,X-DNA与该酶的结合亲和力甚至高于B-DNA;然而,与B型相比,X-聚(氨基2dA-dT)的引物链延伸受到阻碍。DNA聚合酶对X-DNA和B-DNA的这种差异利用是一种异常DNA构象的体外酶学证据。

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