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从印度奥里萨邦分离的霍乱弧菌 O139 菌株 ctxB、tcpA 和 rstR 等位基因的基因组多样性。

Genomic diversities of ctxB, tcpA and rstR alleles of Vibrio cholerae O139 strains isolated from Odisha, India.

机构信息

Microbiology Division, ICMR-Regional Medical Research Centre, Chandrasekharpur, Bhubaneswar, OR, 751023, India.

出版信息

Environ Microbiol Rep. 2022 Jun;14(3):376-384. doi: 10.1111/1758-2229.13016. Epub 2021 Oct 19.

Abstract

The genome of Vibrio cholerae O139 strains has undergone cryptic changes since its first emergence in 1992 in South India. This study aimed to determine the presence of genotypic changes marked in ctxB, tcpA and rstR genes located within the CTX prophages among the strains of V. cholerae O139 isolated from 1999 to 2017 in Odisha. Antibiotic susceptibility test was conducted on 59 V. cholerae O139 strains. A conventional PCR assay was done for ctxB gene typing followed by sequencing along with identification of rstR and tcpA gene. Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) was carried out to reveal clonal variations among the V. cholerae O139 strains. Among V. cholerae O139 isolates more than 60% showed resistance to ampicillin, co-trimoxazole, furazolidone, streptomycin, neomycin and nalidixic acid. The ctxB sequencing and rstR allele-specific PCR assay revealed the presence of three genotypes 1, 3 and 4 with at least one copy of CTX Calc φ in addition to CTX ET and CTX Cl prophages in V. cholerae O139 isolates. PFGE analysis revealed 13 pulsotypes with two clades having 60% similarity among V. cholerae O139 strains. The circulating V. cholerae O139 strains in Odisha showed variation in genotypes with multiple clonal expansions over the years.

摘要

自 1992 年在印度南部首次出现以来,霍乱弧菌 O139 菌株的基因组发生了隐性变化。本研究旨在确定在 1999 年至 2017 年期间从奥里萨邦分离的霍乱弧菌 O139 菌株中,位于 CTX 噬菌体中的 ctxB、tcpA 和 rstR 基因是否存在标记的基因型变化。对 59 株霍乱弧菌 O139 菌株进行了抗生素敏感性试验。进行了 ctxB 基因分型的常规 PCR 检测,随后进行了测序以及 rstR 和 tcpA 基因的鉴定。进行了脉冲场凝胶电泳 (PFGE) 以揭示霍乱弧菌 O139 菌株之间的克隆变异。在霍乱弧菌 O139 分离株中,超过 60%的分离株对氨苄西林、复方磺胺甲噁唑、呋喃唑酮、链霉素、新霉素和萘啶酸表现出耐药性。ctxB 测序和 rstR 等位基因特异性 PCR 检测显示,除了 CTX ET 和 CTX Cl 噬菌体外,霍乱弧菌 O139 分离株中还存在三种基因型 1、3 和 4,其中至少有一个 CTX Calc φ 拷贝。PFGE 分析显示,在霍乱弧菌 O139 菌株中有 13 种脉冲型,其中两个分支之间有 60%的相似性。奥里萨邦循环的霍乱弧菌 O139 菌株在基因型上存在差异,多年来发生了多次克隆扩张。

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