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相似文献

1
Rapid Determination of MBNL1 Protein Levels by Quantitative Dot Blot for the Evaluation of Antisense Oligonucleotides in Myotonic Dystrophy Myoblasts.通过定量斑点印迹法快速测定肌营养不良成肌细胞中 MBNL1 蛋白水平,评估反义寡核苷酸。
Methods Mol Biol. 2022;2434:207-215. doi: 10.1007/978-1-0716-2010-6_13.
2
Muscleblind-like proteins: similarities and differences in normal and myotonic dystrophy muscle.类肌肉盲蛋白:正常肌肉与强直性肌营养不良症肌肉中的异同
Am J Pathol. 2009 Jan;174(1):216-27. doi: 10.2353/ajpath.2009.080520. Epub 2008 Dec 18.
3
Interaction of muscleblind, CUG-BP1 and hnRNP H proteins in DM1-associated aberrant IR splicing.肌盲蛋白、CUG结合蛋白1和不均一核糖核蛋白H在与强直性肌营养不良1型相关的异常胰岛素受体剪接中的相互作用
EMBO J. 2006 Sep 20;25(18):4271-83. doi: 10.1038/sj.emboj.7601296. Epub 2006 Aug 31.
4
Muscleblind-Like 1 and Muscleblind-Like 3 Depletion Synergistically Enhances Myotonia by Altering Clc-1 RNA Translation.肌萎缩蛋白样蛋白 1 和肌萎缩蛋白样蛋白 3 耗竭通过改变 Clc-1 RNA 翻译协同增强肌强直。
EBioMedicine. 2015 Jul 31;2(9):1034-47. doi: 10.1016/j.ebiom.2015.07.028. eCollection 2015 Sep.
5
Increased Muscleblind levels by chloroquine treatment improve myotonic dystrophy type 1 phenotypes in in vitro and in vivo models.氯喹处理增加肌肉盲蛋白水平可改善体外和体内肌强直性营养不良 1 型模型的表型。
Proc Natl Acad Sci U S A. 2019 Dec 10;116(50):25203-25213. doi: 10.1073/pnas.1820297116. Epub 2019 Nov 21.
6
hnRNP L is essential for myogenic differentiation and modulates myotonic dystrophy pathologies.hnRNP L 对于肌生成分化是必不可少的,并调节肌强直性营养不良病理。
Muscle Nerve. 2021 Jun;63(6):928-940. doi: 10.1002/mus.27216. Epub 2021 Mar 22.
7
MBNL1 is the primary determinant of focus formation and aberrant insulin receptor splicing in DM1.MBNL1是DM1中焦点形成和胰岛素受体异常剪接的主要决定因素。
J Biol Chem. 2005 Feb 18;280(7):5773-80. doi: 10.1074/jbc.M410781200. Epub 2004 Nov 16.
8
Triplet-repeat oligonucleotide-mediated reversal of RNA toxicity in myotonic dystrophy.三联体重复寡核苷酸介导的强直性肌营养不良症中RNA毒性的逆转
Proc Natl Acad Sci U S A. 2009 Aug 18;106(33):13915-20. doi: 10.1073/pnas.0905780106. Epub 2009 Aug 10.
9
Analysis of MTMR1 expression and correlation with muscle pathological features in juvenile/adult onset myotonic dystrophy type 1 (DM1) and in myotonic dystrophy type 2 (DM2).分析 1 型肌强直性营养不良(DM1)和 2 型肌强直性营养不良(DM2)青少年/成人发病患者中 MTMR1 的表达及其与肌肉病理特征的相关性。
Exp Mol Pathol. 2010 Oct;89(2):158-68. doi: 10.1016/j.yexmp.2010.05.007. Epub 2010 Jun 1.
10
(CTG)n repeat-mediated dysregulation of MBNL1 and MBNL2 expression during myogenesis in DM1 occurs already at the myoblast stage.(CTG)n 重复介导的 DM1 成肌细胞中 MBNL1 和 MBNL2 表达的失调早在成肌细胞阶段就已经发生。
PLoS One. 2019 May 22;14(5):e0217317. doi: 10.1371/journal.pone.0217317. eCollection 2019.

引用本文的文献

1
Use of HSA female mice as a model for the study of myotonic dystrophy type I.使用人血清白蛋白(HSA)雌性小鼠作为I型强直性肌营养不良研究模型。
Lab Anim (NY). 2025 Apr;54(4):92-102. doi: 10.1038/s41684-025-01506-7. Epub 2025 Feb 27.
2
Peptide-conjugated antimiRs improve myotonic dystrophy type 1 phenotypes by promoting endogenous MBNL1 expression.肽偶联的抗微小RNA通过促进内源性肌肉盲蛋白1(MBNL1)的表达改善1型强直性肌营养不良的表型。
Mol Ther Nucleic Acids. 2023 Sep 5;34:102024. doi: 10.1016/j.omtn.2023.09.001. eCollection 2023 Dec 12.
3
BlockmiR AONs as Site-Specific Therapeutic MBNL Modulation in Myotonic Dystrophy 2D and 3D Muscle Cells and HSA Mice.在强直性肌营养不良2D和3D肌肉细胞以及人源化小鼠中,阻断性微小RNA反义寡核苷酸作为位点特异性治疗性MBNL调节因子
Pharmaceutics. 2023 Mar 31;15(4):1118. doi: 10.3390/pharmaceutics15041118.

本文引用的文献

1
Disease burden of myotonic dystrophy type 1.1 型肌强直性营养不良的疾病负担。
J Neurol. 2019 Apr;266(4):998-1006. doi: 10.1007/s00415-019-09228-w. Epub 2019 Feb 20.
2
RNA-Targeted Therapeutics.RNA靶向治疗药物
Cell Metab. 2019 Feb 5;29(2):501. doi: 10.1016/j.cmet.2019.01.001.
3
Consensus-based care recommendations for adults with myotonic dystrophy type 1.1型强直性肌营养不良症成人患者基于共识的护理建议。
Neurol Clin Pract. 2018 Dec;8(6):507-520. doi: 10.1212/CPJ.0000000000000531.
4
Therapeutic Oligonucleotides: State of the Art.治疗性寡核苷酸:最新进展。
Annu Rev Pharmacol Toxicol. 2019 Jan 6;59:605-630. doi: 10.1146/annurev-pharmtox-010818-021050. Epub 2018 Oct 9.
5
High Throughput, Absolute Determination of the Content of a Selected Protein at Tissue Levels Using Quantitative Dot Blot Analysis (QDB).使用定量斑点印迹分析(QDB)在组织水平上高通量、绝对定量选定蛋白质的含量。
J Vis Exp. 2018 Aug 21(138):56885. doi: 10.3791/56885.
6
miR-23b and miR-218 silencing increase Muscleblind-like expression and alleviate myotonic dystrophy phenotypes in mammalian models.miR-23b 和 miR-218 的沉默可增加肌肉盲样蛋白的表达并减轻哺乳动物模型中的肌强直性营养不良表型。
Nat Commun. 2018 Jun 26;9(1):2482. doi: 10.1038/s41467-018-04892-4.
7
Quantitative dot blot analysis (QDB), a versatile high throughput immunoblot method.定量斑点印迹分析(QDB),一种通用的高通量免疫印迹方法。
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8
Immortalized human myotonic dystrophy muscle cell lines to assess therapeutic compounds.永生化人类强直性肌营养不良症肌肉细胞系用于评估治疗性化合物。
Dis Model Mech. 2017 Apr 1;10(4):487-497. doi: 10.1242/dmm.027367. Epub 2017 Feb 10.
9
Mouse model of muscleblind-like 1 overexpression: skeletal muscle effects and therapeutic promise.肌肉盲样蛋白 1 过表达的小鼠模型:骨骼肌效应及治疗前景。
Hum Mol Genet. 2012 Nov 1;21(21):4645-54. doi: 10.1093/hmg/dds306. Epub 2012 Jul 30.
10
Myotonic dystrophy type 1 is associated with nuclear foci of mutant RNA, sequestration of muscleblind proteins and deregulated alternative splicing in neurons.1型强直性肌营养不良与突变RNA的核内包涵体、肌盲蛋白的隔离以及神经元中失调的可变剪接相关。
Hum Mol Genet. 2004 Dec 15;13(24):3079-88. doi: 10.1093/hmg/ddh327. Epub 2004 Oct 20.

通过定量斑点印迹法快速测定肌营养不良成肌细胞中 MBNL1 蛋白水平,评估反义寡核苷酸。

Rapid Determination of MBNL1 Protein Levels by Quantitative Dot Blot for the Evaluation of Antisense Oligonucleotides in Myotonic Dystrophy Myoblasts.

机构信息

University Research Institute for Biotechnology and Biomedicine (BIOTECMED), Universidad de Valencia, Valencia, Spain.

Translational Genomics Group, Incliva Health Research Institute, Valencia, Spain.

出版信息

Methods Mol Biol. 2022;2434:207-215. doi: 10.1007/978-1-0716-2010-6_13.

DOI:10.1007/978-1-0716-2010-6_13
PMID:35213019
原文链接:https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC9703865/
Abstract

Western blot assays are not adequate for high-throughput screening of protein expression because it is an expensive and time-consuming technique. Here we demonstrate that quantitative dot blots in plate format are a better option to determine the absolute contents of a given protein in less than 48 h. The method was optimized for the detection of the Muscleblind-like 1 protein in patient-derived myoblasts treated with a collection of more than 100 experimental oligonucleotides.

摘要

Western blot 检测不适用于蛋白质表达的高通量筛选,因为它是一种昂贵且耗时的技术。在这里,我们证明了板式定量点印迹是一种更好的选择,可以在不到 48 小时内确定给定蛋白质的绝对含量。该方法针对用超过 100 种实验性寡核苷酸处理的患者来源的成肌细胞中肌肉盲样蛋白 1 的检测进行了优化。