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用于原发性眼细胞和眼类器官中 SARS-CoV-2 感染的方案。

Protocols for SARS-CoV-2 infection in primary ocular cells and eye organoids.

机构信息

Department of Cell, Development and Regenerative Biology, Icahn School of Medicine at Mount Sinai, New York, NY 10029, USA.

Black Family Stem Cell Institute, Icahn School of Medicine at Mount Sinai, New York, NY 10029, USA.

出版信息

STAR Protoc. 2022 Apr 22;3(2):101383. doi: 10.1016/j.xpro.2022.101383. eCollection 2022 Jun 17.

DOI:10.1016/j.xpro.2022.101383
PMID:35664254
原文链接:https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC9023348/
Abstract

Here, we describe a series of protocols detailing the steps for evaluating SARS-CoV-2 infection in models of the human eye. Included are protocols for whole eye organoid differentiation, SARS-CoV-2 infection, and processing organoids for single-cell RNA sequencing. Additional protocols describe how to dissect and culture adult human ocular cells from cadaver donor eyes and how to compare infection of SARS-CoV-2 and the presence of SARS-CoV-2 entry factors using qPCR, immunofluorescence, and plaque assays. For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to Eriksen et al. (2021).

摘要

在这里，我们描述了一系列详细介绍评估人类眼部模型中 SARS-CoV-2 感染的步骤的方案。其中包括全眼类器官分化、SARS-CoV-2 感染和用于单细胞 RNA 测序的类器官处理方案。其他方案描述了如何从尸体供体眼球中分离和培养成人眼细胞，以及如何使用 qPCR、免疫荧光和噬斑分析比较 SARS-CoV-2 和 SARS-CoV-2 进入因子的感染。有关本方案使用和执行的完整详细信息，请参阅 Eriksen 等人（2021 年）。

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