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从单细胞到流式细胞术分析鉴定小鼠黑色素瘤肿瘤免疫微环境的方案。

Protocol to characterize the melanoma tumor immune microenvironment in mice from single cell to flow cytometry analysis.

机构信息

Department of Experimental Medicine, University of Lleida, IRBLleida, Lleida, Spain.

Department of Experimental Medicine, University of Lleida, IRBLleida, Lleida, Spain.

出版信息

STAR Protoc. 2023 Dec 15;4(4):102690. doi: 10.1016/j.xpro.2023.102690. Epub 2023 Nov 18.

DOI:10.1016/j.xpro.2023.102690
PMID:37979181
原文链接:https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC10694585/
Abstract

Here, we present a protocol to study and describe immune cells that surround or infiltrate tumor cells or get through the body of a melanoma syngeneic mice model. We describe steps for creating and establishing the syngeneic mouse model, euthanasia, and tumor or organ harvest. We then detail procedures to rapidly achieve a single-cell suspension from different tissue samples to further quantify and analyze the phenotype of the immune cell population (lymphocytes T and B, tumor-associated macrophages, and myeloid-derived suppressor cells) by flow cytometry.

摘要

在这里，我们提出了一个研究和描述包围或浸润肿瘤细胞或穿过黑色素瘤同基因小鼠模型体的免疫细胞的方案。我们描述了创建和建立同基因小鼠模型、安乐死以及肿瘤或器官收获的步骤。然后，我们详细介绍了从不同组织样本中快速获得单细胞悬液的程序，以通过流式细胞术进一步定量和分析免疫细胞群体（T 和 B 淋巴细胞、肿瘤相关巨噬细胞和髓系来源的抑制细胞）的表型。

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