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用于在无抗生素选择情况下对基因进行CRISPRi敲低的双质粒系统的质粒序列及可用性。

Plasmid sequences and availability of a two-plasmid system for CRISPRi knockdown of genes without antibiotic selection.

作者信息

Chua Michelle, Erickson Daniel, Collins James

机构信息

Department of Microbiology & Immunology, University of Louisville, Louisville, Kentucky, USA.

Center for Predictive Medicine, University of Louisville, Louisville, Kentucky, USA.

出版信息

Microbiol Resour Announc. 2025 Jun 12;14(6):e0011625. doi: 10.1128/mra.00116-25. Epub 2025 Apr 28.

DOI:10.1128/mra.00116-25
PMID:40293262
原文链接:https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC12160543/
Abstract

A two-plasmid CRISPRi system for that does not require antibiotic maintenance was developed. pJAK184.tetR.PT5-3.dCas9 contains an optimized tetracycline-inducible for chromosomal insertion. pJC.15A.sgRNA.TA encodes a toxin-antitoxin system for stable maintenance, and , which is exchangeable for a customized sgRNA. We demonstrate the knockdown of the essential gene .

摘要

开发了一种不需要抗生素维持的双质粒CRISPRi系统。pJAK184.tetR.PT5 - 3.dCas9包含一个用于染色体插入的优化四环素诱导元件。pJC.15A.sgRNA.TA编码一个用于稳定维持的毒素 - 抗毒素系统，以及一个可替换为定制sgRNA的元件。我们展示了必需基因的敲低。

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